HiMedia M1867-500G Модифицированный ацетамидный агар

Сухая питательная агаризованная среда HiMedia M1867-500G Модифицированный ацетамидный агар предназначена для подтверждения Pseudomonas aeruginosa в пробах воды и хранится при 10–30 °C. Среда используется для дифференциации микроорганизмов по способности к деаминированию ацетамида, однако положительная реакция наблюдается только примерно у 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa.

Назначение и тип образца

Модифицированный ацетамидный агар рекомендуется для подтверждения Pseudomonas aeruginosa в пробах воды.

• Тип образца: пробы воды
• Назначение изделия: агар
• Масса: 500 г

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия заявленным рабочим параметрам.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 21,73 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 3,0 г части A.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Разлейте среду по пробиркам или колбам в необходимом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный ацетамидный агар разработан согласно рекомендациям методики исследования воды и сточных вод. Различные нефементирующие микроорганизмы способны утилизировать ацетамид на базальной минеральной среде, однако лишь немногие микроорганизмы, растущие на этой среде, метаболизируют ацетамид посредством деаминирования, связанного с активностью акриламидазы.

Способность к деаминированию ацетамида используется для идентификации ряда нефементирующих грамотрицательных микроорганизмов. Такая реакция характерна для Pseudomonas aeruginosa, группы III Pseudomonas aciovorans (Achromobacter xylosoxidans) и Alcaligenes odorans.

Деаминирование ацетамида приводит к высвобождению аммиака. Аммиак повышает pH среды, вследствие чего индикатор феноловый красный изменяет окраску с жёлто-оранжевой на пурпурно-красную. Некоторым штаммам требуется до 7 суток для проявления положительной реакции, поскольку деаминирование акриламида происходит медленно.

Среда содержит неорганические соли, а ацетамид используется как единственный источник углерода и азота. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Феноловый красный выполняет функцию индикатора pH.

Положительная реакция не является достаточным самостоятельным критерием идентификации: только примерно 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa демонстрируют положительную реакцию.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 4–7 суток.

• Обозначения в скобках соответствуют номерам WDCM.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: бесцветные гигроскопичные расплывающиеся кристаллы.
• Часть B: от светло-жёлтого до кирпично-красного цвета; однородный сыпучий порошок.

Желирование

Прочность геля: плотный гель, сопоставимый с гелем, приготовленным из 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенной среды образуется оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция указана для смеси, содержащей 0,3 % масс./об. части A и 2,17 % части B, при 25 °C.

• pH: 6,30 ± 0,2
• Рабочий диапазон pH: 6,10–6,50

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применяемыми руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Только примерно 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa демонстрируют положительную реакцию. Поэтому результат теста не следует использовать как единственный критерий идентификации.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности. Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и