HiMedia M1867-500G Модифицированный ацетамидный агар

Модифицированный ацетамидный агар HiMedia M1867-500G предназначен для подтверждения наличия Pseudomonas aeruginosa в пробах воды. Среда используется для идентификации неферментирующих грамотрицательных организмов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда модифицированного ацетамидного агара сформулирована в соответствии с рекомендациями «Стандартных методов исследования воды и сточных вод» (Standard Methods for Examination of Water and Wastewater). Принцип анализа основан на способности некоторых неферментирующих грамотрицательных организмов метаболизировать ацетамид посредством процесса дезаминирования (акриламидазная активность).

В ходе дезаминирования ацетамида высвобождается аммиак, что приводит к повышению pH среды. Это вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного с желто-оранжевого на пурпурно-красный. Данная способность характерна для Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas aciovorans группы III (Achromobacter xylosoxidans) и Alcaligenes odorans.

В составе среды ацетамид служит единственным источником углерода и азота, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а феноловый красный выступает в роли pH-индикатора.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 21,73 г компонента B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 3,0 г компонента A.
3. Нагрейте смесь до кипения для полного растворения компонентов.
4. Разлейте среду по пробиркам или колбам.
5. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
6. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скошенной поверхности агара.

Область применения и ограничения

Среда применяется для анализа проб воды.

Ограничения:

• Только около 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa дают положительную реакцию.
• В связи с этим данный тест не рекомендуется использовать как единственный критерий идентификации.
• Некоторым штаммам требуется до семи дней для проявления положительной реакции из-за медленного дезаминирования акриламида.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: Компонент A — бесцветные деликвесцентные (расплывающиеся) кристаллы; Компонент B — однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до кирпично-красного цвета.
• Желирование: Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: Оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках-скосах).
• Реакция (pH при 25 °C): 6,30 $\pm$ 0,2 (для смеси 0,3 % в/в компонента A и 2,17 % компонента B).
• Диапазон pH: 6,10–6,50.

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 4–7 суток.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация и безопасность

• Безопасность: при работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с локальными стандартами по обращению с инфекционными материалами.