Агар B12 Culture Agar (E. coli Maintenance Medium) HiMedia M185-100G (100 г)

Питательная агаризованная среда Агар B12 Culture Agar (E. coli Maintenance Medium) HiMedia M185-100G (100 г) производства HiMedia предназначена для выращивания и поддержания мутантных культур Escherichia coli, используемых при микробиологическом анализе витамина B₁₂. Среда выпускается в виде порошка, содержит агар и имеет конечный pH 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение

Агар B12 Culture Agar применяется для распространения, культивирования и поддержания мутантных штаммов Escherichia coli, используемых в микробиологическом анализе витамина B₁₂.

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

HL-экстракт эквивалентен печёночному экстракту.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

B12 Culture Agar, также обозначаемый как E. coli Mutant Culture Agar, предназначен для культивирования и поддержания E. coli ATCC 11105.

Функции компонентов среды:

• триптон обеспечивает азот и аминокислоты, необходимые для роста E. coli 1133;
• дрожжевой экстракт является источником витаминов;
• сахароза служит источником углерода и энергии;
• калиевая соль обеспечивает буферную ёмкость среды;
• соли натрия, магния и железа регулируют проницаемость бактериальных клеток;
• HL-экстракт обогащает среду для роста E. coli и подавляет грамположительные бактерии.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,85 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Подготовка и поддержание культур

Маточные культуры E. coli ATCC 11105 подготавливают методом посева уколом не менее трёх раз в неделю.

Культуру нельзя использовать для приготовления инокулята для анализа, если её возраст превышает 4 дня.

Перед использованием свежей культуры для анализа необходимо выполнить не менее 10 последовательных пересевов культуры в течение 15 дней.

Условия инкубации культур: 35 °C в течение 16–24 ч; температура должна поддерживаться постоянной в пределах ±0,5 °C.

После инкубации культуры хранят при 2–8 °C.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скошенного агара образуется жёлтый слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакцию определяют для 3,79%-ного водного раствора при 25 °C.

Реакция: pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Упаковка: плотно закрытый контейнер.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия продукт необходимо хранить в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды рассчитаны на применение в течение указанного срока годности.

Обращение с образцами и меры предосторожности

Перед открыванием контейнера необходимо прочитать этикетку.

При работе следует использовать:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с образцами и культурами необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

При обращении с образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Культуру нельзя использовать для приготовления инокулята для анализа, если её возраст превышает 4 дня.

Стерилизация и утилизация

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.