HiMedia M1848-100G Основа CFC агара (цефалотин-натрия фузидат-цетримид)

Основа CFC агара (цефалотин-натрия фузидат-цетримид) HiMedia M1848-100G для селективного выделения бактерий рода Pseudomonas. Среда разработана в соответствии со спецификациями ISO 13720:2010 и EN ISO 11133:2014; вес упаковки составляет 100 г.

Область применения

Среда рекомендуется для количественного определения видов Pseudomonas в мясе и мясных продуктах, включая мясо птицы, с помощью метода подсчёта колоний. Применяется для анализа пищевых проб.

Принцип измерения

Основа CFC агара (CFC Agar Base) приготовлена согласно стандарту ISO 13720 и содержит хлорид магния и сульфат калия для усиления выработки пигмента микроорганизмами. Для обеспечения селективности в среду добавляется модифицированная селективная добавка CFC (Modified CFC Selective Supplement), содержащая цефалотин, фузидат натрия и цетримид. Данная комбинация компонентов подавляет рост видов Klebsiella, Proteus и Providencia.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 52,4 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое двух флаконов стерильной регидратированной модифицированной селективной добавки CFC (FD281).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри. Примечание: Не выдерживайте расплавленный агар более 4 часов.

Процедура посева и инкубации (согласно ISO 13720:2010)

1. С помощью стерильной пипетки перенесите 0,1 мл первого десятикратного разведения исходной суспензии на чашку с CFC агаром (M1848).
2. Распределите жидкость по поверхности агара стерильным шпателем.
3. Инкубируйте чашки перевернутыми (крышками вниз) при температуре 25 °C $\pm$ 1 °C в течение 44 $\pm$ 4 ч.

Подтверждающий тест

Для подтверждения выберите случайным образом пять колоний и проведите реакцию на оксидазу:

• Поместите диск для определения оксидазы (DD018) на выбранную колонию.
• Появление фиолетового или пурпурного цвета в течение 10 секунд считается положительным результатом.
• Отсутствие изменения цвета через 30 секунд считается отрицательным результатом.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (водный раствор 5,24 % мас./об. при 25 °C: 7,2 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Инкубация при 25 $\pm$ 1 °C в течение 44 $\pm$ 4 часов. Степень восстановления считается 100 % при росте бактерий на контрольной среде — соево-казеиновом дигест-агаре (Tryptone Soya Agar).

Ограничения и меры предосторожности

• Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Каждая партия среды протестирована на организмы, указанные в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести собственную валидацию.
• Для окончательного подтверждения требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.
• При работе со средой и образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.