Основа селективного агара HiCrome для сальмонелл HiMedia M1842-100G (уп/100 гр)

Основа селективного агара HiCrome для сальмонелл HiMedia M1842-100G (уп/100 гр) — сухая питательная среда для дифференциального выделения Salmonella spp. с образованием фиолетовых колоний. Применяется для анализа пищевых и клинических образцов после предварительного обогащения; готовую среду инкубируют при 35–37 °C в течение 22–24 ч.

Назначение

Основа селективной питательной среды предназначена для селективного выделения и дифференциации видов Salmonella из пищевых и клинических образцов.

Среда используется для:

• выделения Salmonella spp. из пищевых продуктов;
• анализа клинических образцов, включая кал и мочу;
• идентификации сальмонелл по цвету колоний;
• подсчёта числа микроорганизмов в образце после предварительного обогащения.

Для пищевых образцов рекомендуется предварительное обогащение в селективном бульоне для обогащения сальмонелл M1843 с последующим высевом на основу селективного агара HiCrome для сальмонелл. Для работы с клиническими образцами применяют установленные методики сбора, транспортировки и обработки материала.

Принцип действия и интерпретация

Среда содержит хромогенную смесь для идентификации и дифференциации видов Salmonella. Хромогенный субстрат расщепляется ферментами микроорганизмов, в результате чего образуются окрашенные колонии:

• Salmonella формирует преимущественно фиолетовые колонии;
• некоторые представители семейства Enterobacteriaceae, включая Klebsiella и Enterobacter, формируют синие или тёмно-синие колонии.

Натрия холат, натрия таурохолат и натрия дезоксихолат ограничивают рост посторонних микроорганизмов. Дополнительно селективная добавка FD274 подавляет конкурирующую микрофлору.

Порошок HI, гидролизат дрожжей и триптоза обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми для роста питательными веществами. Порошок HI эквивалентен сердечному настою.

Традиционные методы обнаружения сальмонелл основаны на образовании H₂S, однако такую реакцию могут давать и другие виды, не относящиеся к Salmonella, включая Citrobacter и Proteus. Поэтому подозрительные колонии требуют дальнейшего биохимического и серологического подтверждения.

Salmonella Typhi и Salmonella Paratyphi A и B вызывают гастроэнтерит, бактериемию и кишечную лихорадку. Salmonella Choleraesuis вызывает гастроэнтерит и кишечную лихорадку, особенно у детей. Salmonella Typhimurium является одним из наиболее часто выделяемых серотипов Salmonella.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Состав, г/л:

* Эквивалент сердечного настоя.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 54,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NC Selective Supplement FD274.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

Тип образца

• Клинические образцы: кал, моча и другие материалы.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Из-за высокой селективности некоторые штаммы могут расти слабо.
2. Большинство штаммов Salmonella образует фиолетовые колонии, однако для отдельных штаммов возможны отклонения.
3. Окончательное подтверждение подозрительных колоний необходимо проводить серологическими и биохимическими тестами.
4. Выросшие колонии требуют дальнейшего биохимического подтверждения идентификации.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены при использовании селективной добавки NC Selective Supplement FD274 после инкубации при 35–37 °C в течение 22–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок светло-жёлтого или бежевого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется непрозрачный гель беловато-кремового цвета.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 5,4 % м/об при 25 °C.
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.
• Состояние готовой среды: беловато-кремовый опалесцирующий гель.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: +2…+8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: +2…+8 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая упаковка, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия банку необходимо плотно закрывать и хранить в сухом состоянии.
• Порошок является гигроскопичным; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Меры предосторожности

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения.

При открывании контейнера и работе с образцами и культурами:

• предварительно ознакомьтесь с маркировкой;
• используйте защитные перчатки;
• используйте защитную одежду;
• применяйте средства защиты глаз и лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• при работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности;
• руководствуйтесь требованиями индивидуальных паспортов безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов должны соблюдаться в полном объёме. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от традиционного обнаружения сальмонелл только по образованию H₂S, среда HiCrome использует хромогенную дифференциацию по цвету колоний, при этом окончательная идентификация всё равно требует биохимического и серологического подтверждения.