ХайХром агар для обнаружения термотолерантных E.coli HiMedia M1832-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда ХайХром агар для обнаружения термотолерантных E.coli HiMedia M1832-500G (уп/500 гр) — селективный агар для одновременного выявления Escherichia coli и термотолерантных колиформных бактерий. Среда предназначена для анализа воды, молока, молочных продуктов и пищевых образцов; для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Среда HiCrome Coliform Agar Modified рекомендована для селективного одновременного обнаружения Escherichia coli и термотолерантных колиформных бактерий в:

• пищевых образцах;
• молоке и молочных продуктах;
• образцах воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Тип продукта: HiCrome™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2012/12473

Принцип действия и интерпретация результатов

Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы источниками углерода, азотистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ. Фосфаты обеспечивают эффективное буферирование среды. Сульфат магния способствует развитию окраски. Желчные соли подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата, предназначенных для выявления двух специфических ферментов: β-галактозидазы и β-глюкуронидазы. β-галактозидаза, вырабатываемая колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов, в результате чего колонии колиформ приобретают розовую окраску.

β-глюкуронидаза, вырабатываемая Escherichia coli, расщепляет X-глюкуронид. В результате расщепления обоих хромогенов колонии Escherichia coli приобретают тёмно-синюю или фиолетовую окраску. Штаммы Escherichia coli, отрицательные по β-глюкуронидазе, включая серотип O157:H7, образуют розовые колонии.

Другие грамотрицательные бактерии, способные расти при 44 ± 0,5 °C, образуют белые или бесцветные колонии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика проведения анализа

1. Перенесите по 1 мл исследуемого продукта и его десятикратных разведений в стерильные чашки Петри.
2. Добавьте 12 мл приготовленной среды, тщательно перемешайте и оставьте до затвердевания.
3. Налейте поверх затвердевшего слоя ещё 4 мл среды и оставьте до затвердевания.
4. Инкубируйте посевы при 43–45 °C в течение 18–24 ч.

Требования к образцам и обращение с ними

Для пищевых образцов и молочных продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам. Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом действующих руководств и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или бежевый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель от светло-жёлтого до жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,4 % (м/об.) при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч; при необходимости инкубацию продолжают до 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов Escherichia coli, однако некоторые штаммы Escherichia coli могут быть отрицательными по β-глюкуронидазе.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут расти слабо вследствие различий в питательных потребностях.
3. Для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• Порошок гигроскопичен; попадание влаги может привести к образованию комков.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при соблюдении рекомендованных условий хранения и использовании в пределах указанного срока годности.

Требования безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиолог