HiMedia M1832-100G Модифицированный HiCrome колиформный агар

Модифицированный HiCrome колиформный агар HiMedia M1832-100G — селективная сухая питательная среда для одновременного выявления Escherichia coli и термотолерантных колиформ. Применяется для анализа проб воды, молока, молочных продуктов и пищевых образцов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда HiCrome® Coliform Agar Modified предназначена для одновременного обнаружения E. coli и термотолерантных колиформ.

Роль компонентов

• Специальный пептон и дрожжевой экстракт: обеспечивают организм углеродом, азотистыми соединениями, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и необходимыми питательными веществами.
• Фосфаты: поддерживают стабильный pH среды.
• Сульфат магния: способствует развитию окраски колоний.
• Желчные соли: подавляют рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Хромогенная смесь: содержит два хромогенных субстрата для определения активности двух специфических ферментов — $\beta$-галактозидазы и $\beta$-глюкуронидазы.

Интерпретация результатов

• Колиформы: вырабатывают $\beta$-галактозидазу, которая расщепляет один из хромогенов, что приводит к окрашиванию колоний в розовый цвет.
• E. coli: вырабатывает $\beta$-глюкуронидазу, которая расщепляет X-глюкуронид. Поскольку E. coli расщепляет оба хромогена, колонии приобретают темно-синий или фиолетовый цвет.
• E. coli (серотип O157:H7): штаммы, отрицательные по $\beta$-глюкуронидазе, образуют розовые колонии.
• Другие грамотрицательные бактерии: способные расти при температуре (44 $\pm$ 0,5 °C), образуют белые или бесцветные колонии.

Методика проведения анализа

1. Перенесите 1 мл исследуемого продукта (или его десятикратных разведений) на стерильные чашки Петри.
2. Залейте 12 мл среды, тщательно перемешайте и дайте застыть.
3. Нанесите поверхностный слой из 4 мл среды, дайте застыть.
4. Инкубируйте при температуре 43–45 °C в течение 18–24 часов.

Приготовление среды

1. Растворите 24 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: светло-желтый или бежевый однородный свободнотекущий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0% агаром.
• Цвет и прозрачность: светло-желтый или желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 2,4% водного раствора при 25 °C составляет 7,2 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24 часов (при необходимости до 48 часов).

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды.

Ограничения

• Фермент $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными по этому признаку.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация: загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.