HiMedia M1832-100G Модифицированный HiCrome колиформный агар

Питательная селективная агаризованная среда HiMedia M1832-100G Модифицированный HiCrome колиформный агар предназначена для одновременного выявления Escherichia coli и термотолерантных колиформных бактерий. Среда применяется для анализа воды, молока, молочных и пищевых продуктов с инкубацией при 43–45 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Среда рекомендована для селективного одновременного выявления Escherichia coli и термотолерантных колиформных бактерий в образцах:

• воды;
• молока;
• молочных продуктов;
• пищевых продуктов.

Тип образца: пищевые и молочные продукты; вода.

Состав

Расход среды: 24 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Модифицированный колиформный агар HiCrome® представляет собой селективную среду для одновременного выявления E.coli и термотолерантных колиформных бактерий в образцах воды и пищевых продуктов.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азотистых соединений, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами;
• фосфаты обеспечивают буферную способность среды;
• сульфат магния участвует в развитии окраски;
• желчные соли подавляют грамположительные микроорганизмы;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата для выявления двух специфических ферментов: β-галактозидазы и β-глюкуронидазы.

Колиформные бактерии продуцируют β-галактозидазу, расщепляющую один из хромогенов, в результате чего колонии приобретают розовую окраску. E.coli продуцирует β-глюкуронидазу, расщепляющую X-глюкуронид. За счёт расщепления обоих хромогенов колонии E.coli имеют тёмно-синюю или фиолетовую окраску.

Штаммы E.coli, отрицательные по β-глюкуронидазе, включая серотип O157:H7, образуют колонии розового цвета. Другие грамотрицательные бактерии, способные расти при 44 ± 0,5 °C, образуют белые или бесцветные колонии.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию 24 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; указанное давление составляет 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика анализа образцов

1. Внесите 1 мл исследуемого продукта или его десятикратных разведений в стерильные чашки Петри.
2. Добавьте 12 мл приготовленной среды.
3. Тщательно перемешайте содержимое чашек.
4. Оставьте среду до застывания.
5. Налейте поверх застывшего слоя ещё 4 мл среды.
6. Дождитесь застывания верхнего слоя.
7. Инкубируйте посевы при 43–45 °C в течение 18–24 ч.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо простерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.

При работе с образцами и культурами:

• используйте защитные перчатки;
• носите защитную одежду;
• используйте средства защиты глаз;
• используйте средства защиты лица;
• соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории;
• соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с образцами;
• обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности для получения специальных указаний по безопасности.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E.coli, однако отдельные штаммы E.coli могут быть отрицательными по этому ферменту.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях и составе питательных веществ.
3. Для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно инструкции на этикетке и использовании в пределах срока годности при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Внешний вид

Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до бежевого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель от светло-жёлтого до жёлтого цвета.

Реакция

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,4 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч; при необходимости инкубацию продолжают до 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1832-100G
• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Тип продукта: HiCrome™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Условия хранения сухой среды: 15–25 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.

Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия тщательно