HiMedia M1830-100G Основа HiCrome VRE агара

Сухая селективная питательная среда HiMedia M1830-100G Основа HiCrome VRE агара — порошковая основа для выделения ванкомицин-резистентных энтерококков (VRE) из клинических образцов. Применяется в клинической микробиологии для анализа фекалий, мочи и других образцов; межвидовую дифференциацию Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium подтвердить нельзя.

Назначение

Основа HiCrome VRE агара рекомендована как селективная среда для выделения ванкомицин-резистентных энтерококков (VRE) из клинических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эксплуатационных характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Энтерококки являются распространёнными представителями нормальной микрофлоры кишечника млекопитающих. Ванкомицин-резистентные энтерококки представляют собой группу энтерококков, у которых развилась устойчивость к нескольким антибиотикам, особенно к ванкомицину.

Энтерококковые инфекции, вызывающие заболевания у человека, могут быть смертельными, особенно инфекции, обусловленные штаммами ванкомицин-резистентных энтерококков. Раннее выявление VRE важно для предотвращения распространения устойчивости к ванкомицину у Enterococcus faecalis. VRE могут передаваться от человека к человеку, особенно в больницах и учреждениях длительного ухода. Микроскопические количества фекального материала инфицированного пациента или носителя могут загрязнять больничную среду и способствовать распространению инфекции.

Для выявления VRE применяются традиционные среды, включая основу или агар для ванкомицин-резистентных энтерококков с добавлением ванкомицина, а также желчно-эскулиновый агар с ванкомицином.

Специальный пептон обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми для роста микроорганизмов питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Буферные компоненты обеспечивают буферную ёмкость среды.

Enterococcus faecalis расщепляет хромогенный субстрат в составе среды с образованием колоний голубовато-зелёного цвета, хорошо заметных на непрозрачном фоне. Добавляемая селективная добавка обеспечивает избирательное выделение ванкомицин-резистентных энтерококков.

Среду можно инокулировать непосредственно тампоном для скрининга либо выделенной колонией, приготовленной в виде жидкой суспензии мутностью приблизительно 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.

Типы образцов

Клинические образцы:

• фекалии;
• моча;
• другие клинические образцы.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 50,95 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое двух флаконов селективной добавки VF Selective Supplement (FD277).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Отбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методическими требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими требованиями.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Некоторые промежуточные виды могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах и устойчивости к ванкомицину.
2. Возможны небольшие различия в окраске в зависимости от использования субстрата конкретным микроорганизмом.
3. Межвидовую дифференциацию между Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium нельзя подтвердить с помощью данной среды.
4. Для дальнейшего подтверждения необходимо провести исследование чувствительности.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется непрозрачный гель грязно-белого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,1 % при 25 °C.
• pH: 6,30–6,70.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки VF Selective Supplement (FD277).

• Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Упаковка при хранении: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Эксплуатационные характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Технические характеристики

Сравнительное техническое отличие

В отличие от традиционных сред для выявления VRE, включая желчно-эскулиновый агар с ванкомицином, основа HiCrome VRE агара использует хромогенный субстрат для образования голубовато-зелёных колоний Enterococcus faecalis и селективную добавку VF Selective Supplement (FD277) для выделения ванкомицин-резистентных энтерококков.