HiMedia M1829-100G Основа HiCrome ESBL агара

Питательная среда HiMedia M1829-100G Основа HiCrome ESBL агара — порошкообразная основа хромогенной селективной среды для выделения энтеробактерий, продуцирующих β-лактамазы расширенного спектра. HiMedia M1829-100G применяется для скринингового анализа клинических образцов, при этом прямой посев изолированной колонии не допускается из-за риска ложноположительных результатов.

Назначение

Основа HiCrome ESBL агара предназначена для селективного выделения энтеробактерий, продуцирующих β-лактамазы расширенного спектра (БЛРС; ESBL).

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Бактерии, продуцирующие БЛРС, представляют проблему при выявлении инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Наиболее распространённые возбудители, продуцирующие БЛРС, — Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae и Klebsiella oxytoca.

БЛРС-продуцирующие микроорганизмы обычно устойчивы к нескольким классам антибиотиков, включая аминогликозиды и фторхинолоны. Такие микроорганизмы способны гидролизовать новые цефемы и монобактамы, а также цефалоспорины узкого спектра действия и пенициллины, активные против грамотрицательных бактерий. БЛРС-продуцирующие микроорганизмы связаны с повышенной летальностью и трудно поддаются выявлению и лечению.

Основа HiCrome ESBL агара представляет собой хромогенную скрининговую среду для селективного выделения микроорганизмов, продуцирующих БЛРС. Смесь пептонов служит источником углерода и азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других питательных веществ. Хромогенная смесь обеспечивает дифференциацию БЛРС-продуцирующих микроорганизмов по окраске колоний. Селективная добавка AC3F (FD278) подавляет рост других контаминирующих микроорганизмов.

БЛРС-продуцирующие штаммы E. coli формируют колонии от розового до фиолетового цвета. БЛРС-продуцирующие представители группы KESC образуют голубовато-зелёные колонии. Proteus, Morganella и Providencia не используют хромоген и формируют бесцветные или светло-коричневые колонии.

Для инокуляции используется жидкая суспензия мутностью, соответствующей 0,5 по шкале Мак-Фарланда, приготовленная из ректальных скрининговых мазков, фекальных образцов или изолированной колонии. Изолированные колонии нельзя непосредственно высевать на эту среду, поскольку высокая посевная доза может привести к ложноположительным результатам. Рекомендуется дополнительное подтверждение с помощью биохимических идентификационных тестов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов/дюйм² соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте восстановленное содержимое двух флаконов селективной добавки AC3F (FD278).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы:
  • ректальные скрининговые мазки;
  • моча;
  • фекальные образцы;
  • другие клинические материалы.
• Изолированные колонии.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами следует применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными процедурами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется жёлтый опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 4,0%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч с добавлением селективной добавки AC3F (FD278).

• Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
2. В зависимости от штамма возможны небольшие вариации окраски.
3. Изолированные колонии нельзя непосредственно высевать на эту среду, поскольку высокая посевная доза может привести к ложноположительным результатам.
4. Рекомендуется дополнительное подтверждение с помощью биохимических идентификационных тестов.

Условия хранения и срок годности

• Хранение порошка: при 15–25 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• Порошок обладает гигроскопичностью; нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный контекст

В отличие от неиндикаторных селективных сред, основа HiCrome ESBL агара использует хромогенную смесь для дифференциации БЛРС-продуцирующих микроорганизмов по цвету колоний.

Комплект поставки

• Основа HiCrome ESBL агара, 100 г.

Условия хранения при получении

Хранить при 15–25 °C.