HiMedia M1803-500G Основа агара для Clostridium brazier

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia M1803-500G Основа агара для Clostridium brazier предназначена для селективного выделения и дифференциации Clostridium difficile после добавления соответствующих компонентов. Основа используется для анализа пищевых образцов; готовая среда применяется при анаэробной инкубации при 35–37 °C и требует добавления селективной добавки, эмульсии яичного желтка и лизированной крови лошади.

Назначение

Основа предназначена для приготовления селективной питательной среды для выделения и дифференциации Clostridium difficile с добавлением:

• добавки для Clostridium difficile FD010;
• эмульсии яичного желтка FD045;
• 10 мл лизированной крови лошади.

Тип образцов: пищевые образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 47,66 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 2 флаконов добавки для Clostridium difficile FD010, 40 мл эмульсии яичного желтка FD045 и 10 мл лизированной крови лошади.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Заболевания, вызываемые Clostridium difficile, патогенным представителем рода Clostridium, поражающим кишечник, включают псевдомембранозный колит, колит, ассоциированный с применением антибиотиков, хронические воспалительные заболевания кишечника, послеоперационную диарею и диарею, не связанную с применением антибиотиков.

Типичные признаки роста Clostridium difficile на среде выявляют через 24 ч анаэробной инкубации при 35–37 °C. Колонии C. difficile обычно серые, непрозрачные, плоские или слегка приподнятые, преимущественно округлые, но могут иметь вытянутую форму. При дальнейшем культивировании до 48 ч колонии могут становиться светло-серыми, приобретать белый центр и сохранять непрозрачность; диаметр колоний составляет 4–6 мм.

Морфология C. difficile при окраске по Граму может не выявляться в колониях, взятых с этой среды, из-за присутствия антибиотиков.

Селективные компоненты добавки для Clostridium difficile FD010 — D-циклосерин и цефокситин — подавляют рост большинства представителей семейства Enterobacteriaceae, а также Enterococcus faecalis, стафилококков, грамотрицательных анаэробных бацилл и видов Clostridium, отличных от C. difficile, которые могут присутствовать в образцах в большом количестве.

Эмульсия яичного желтка FD045 способствует дифференциации C. difficile и лецитиназоположительных клостридий. Добавление лизированной крови лошади повышает выявляемость флуоресценции колоний при исследовании под ультрафиолетовым светом. Холиевая кислота, присутствующая в среде, стимулирует прорастание спор после шоковой обработки, а p-гидроксифенилуксусная кислота усиливает образование p-крезола — характерного метаболита C. difficile.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1803-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Вес: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Концентрация водного раствора для проверки реакции: 4,76 % масс./об.
• Условия хранения основы: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• Среда после добавления эмульсии яичного желтка FD045 и 10 мл лизированной крови лошади: в чашках Петри образуется непрозрачный гель цвета загара.

Реакция

Реакция 4,76%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробных условиях на среде с добавкой для Clostridium difficile FD010, эмульсией яичного желтка FD045 и 10 мл лизированной крови лошади после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч.

| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии | Лецитиназная активность | | --- |