HiMedia M179-100G Основа олеинового агара Дюбо

Компонент питательной среды HiMedia M179-100G Основа олеинового агара Дюбо — порошковая основа для культивирования микобактерий. Основа применяется для первичного выделения и последующего культивирования микобактерий, включая Mycobacterium tuberculosis, с добавлением олеин-альбуминовой добавки и пенициллина.

Назначение

Основа олеинового агара Дюбо рекомендована для культивирования микобактерий. Тип образца — клинический материал, в частности мокрота.

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения в микробиологических лабораториях.

Состав

Расчётное содержание компонентов:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Mycobacterium tuberculosis, возбудитель туберкулёза человека, переносится в воздушных частицах — аэрозольных ядрах, образующихся при кашле пациентов с лёгочным туберкулёзом. Инфицирование происходит при вдыхании восприимчивым человеком аэрозольных ядер, содержащих бактерии.

Микобактерии обычно выделяют на средах, в основе которых находится коагулированное яйцо или агар. Среды Middlebrook и Dubos содержат агар, тогда как среды Löwenstein содержат яйцо. Преимущество агара заключается в том, что сопутствующие протеолитические загрязняющие микроорганизмы не разжижают среду. Агаровые среды обычно рекомендуются для исследования образцов, полученных из нестерильных участков.

Среды на основе агара можно сделать селективными добавлением антибиотиков, поскольку они затвердевают за счёт агара, а не вследствие упаривания и уплотнения яичной основы. Dubos и Middlebrook рекомендовали основу олеинового бульона Дюбо для первичного выделения и последующего культивирования туберкулёзных микобактерий. В сравнительных исследованиях различных сред основа олеинового агара Дюбо показала пригодность для первичного выделения бактерий.

Триптон и L-аспарагин в составе среды служат источниками азота. Фосфаты совместно с хлоридом кальция обеспечивают буферные свойства среды и служат источниками фосфатов. Сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммония железа обеспечивают поступление микроэлементов и сульфатов. Олеиновый агар Дюбо приготовлен без глицерина и декстрозы для предотвращения роста комменсальных микроорганизмов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 4 г порошка в 180 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте к стерильным охлаждённым 180 мл среды 20 мл стерильной олеин-альбуминовой добавки FD020 и 5 000–10 000 единиц пенициллина.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или чашки.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При выделении микобактерий из исследуемых образцов следует применять стандартные процедуры. Перед посевом образец необходимо надлежащим образом деконтаминировать в соответствии со стандартными методами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Во время инкубации необходимо обеспечить надлежащие аэробные условия и повышенное содержание CO₂. Отсутствие этих условий может привести к отрицательному результату.

Условия культивирования

Культуральные характеристики оценивают при наличии 5–10 % CO₂, после добавления стерильной олеин-альбуминовой добавки FD020 и 5 000–10 000 единиц пенициллина, при температуре 35–37 °C в течение до 7 суток. Дальнейший рост может наблюдаться в течение 2–4 недель.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция среды

Реакция 2,0%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,40–6,80.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Продукт гигроскопичен; нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо деконтаминировать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие от яичных сред

В отличие от сред на основе коагулированного яйца, среда Дюбо затвердевает за счёт агара; это препятствует разжижению среды сопутствующими протеолитическими микроорганизмами. Формула также не содержит глицерин и декстрозу, чтобы не поддерживать рост комменсальных микроорганизмов.