HiMedia M1780-500G TS солевой агар (трехсахарный солевой железный агар)

Питательная агаризованная среда HiMedia M1780-500G TS солевой агар (трехсахарный солевой железный агар) предназначена для идентификации видов Vibrio, особенно Vibrio parahaemolyticus, по ферментации глюкозы, лактозы и сахарозы и образованию H₂S. Среда применяется для биохимической дифференциации микроорганизмов по реакциям в скошенной части и столбике, при конечном pH 7,4 ± 0,2 и фасовке 500 г.

Назначение

Среда используется для идентификации видов Vibrio, особенно Vibrio parahaemolyticus, на основании:

• ферментации декстрозы (глюкозы), лактозы и сахарозы;
• образования сероводорода H₂S;
• продукции газа;
• изменения реакции среды в скошенной части и столбике.

Методика применения среды соответствует ISO 8914:1990 как методу, рекомендованному для идентификации Vibrio parahaemolyticus.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 92,62 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте и распределите среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.
5. Охладите среду в наклонном положении, чтобы сформировать столбик глубиной около 2,5 см.

Принцип измерения и интерпретация

TS солевой агар — трехсахарный солевой железный агар — содержит пептический перевар тканей животного происхождения, мясной и дрожжевой экстракты, которые обеспечивают микроорганизмы азотистыми соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Лактоза, сахароза и глюкоза являются ферментируемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для определения H₂S. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, из-за чего цвет среды изменяется с красного на жёлтый. В столбике образуется больше кислот в результате ферментации, чем в скошенной части в результате дыхания. Растущие бактерии также формируют щелочные продукты окислительного декарбоксилирования пептона; эти продукты нейтрализуют большое количество кислоты, присутствующей в столбике.

Щелочная красная скошенная часть и кислая жёлтая зона столбика после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу либо оба углевода одновременно в дополнение к глюкозе, образуют большое количество кислоты. В соответствующей зоне pH не возвращается к исходному значению, поэтому формируются кислая скошенная часть и кислый столбик.

Образование газа определяется по наличию трещин или пузырьков в среде, возникающих при выходе накопившегося газа. Тиосульфат восстанавливается несколькими видами бактерий до сероводорода H₂S. Сероводород реагирует с ионами железа солей железа с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике пробирки.

Интерпретация реакций

• Щелочная скошенная часть / кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислая скошенная часть / кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, глюкоза и лактоза либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Наличие пузырьков или трещин: образование газа, CO₂.
• Наличие чёрного осадка: образование газа H₂S.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель розовато-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 9,26%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.