HiMedia M1752-500G K агар

Питательная среда HiMedia M1752-500G K агар представляет собой порошковый агар массой 500 г. HiMedia M1752-500G K агар применяется для выделения и культивирования Alicyclobacillus в фруктовых соках по официальному методу IFU; рабочая температура инкубации составляет 45 ± 1 °C.

Назначение

K-агар рекомендуется для выделения и культивирования Alicyclobacillus в фруктовых соках и концентрированных соках по стандартному методу Международной федерации производителей фруктовых соков (IFU), метод № 12.

Состав

Состав среды на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 3,7 ± 0,1.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,5 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление — 15 фунтов, приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду примерно до 50 °C.
5. Отрегулируйте pH до 3,7 ± 0,1 с помощью 25%-ного раствора L-яблочной кислоты.

Принцип действия и интерпретация

Alicyclobacillus — аэробные термофильные непатогенные спорообразующие бактерии, способные выживать при относительно мягких температурах пастеризации, применяемых для фруктовых соков и концентратов. Даже очень низкое содержание Alicyclobacillus может вызывать порчу напитков и появление посторонних привкусов.

Бактерии способны расти при значениях pH до 2,5 и при повышенных температурах выше 200 °C. Споры Alicyclobacillus длительное время сохраняются во фруктовых концентратах и аналогичных средах.

Наиболее часто встречающийся вид, вызывающий появление посторонних привкусов в соках и аналогичных продуктах, — A. acidoterrestris; другие виды также могут вызывать изменение вкуса продукта.

Для обнаружения и выделения A. acidoterrestris требуется кислая среда. Поэтому K-агар рекомендуется для выявления продуцирующих посторонние привкусы штаммов Alicyclobacillus acidoterrestris в соответствии с методом IFU № 12.

Пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота, аминокислот, витаминов и других необходимых для роста компонентов. Глюкоза является источником углерода. Полисорбат 80 служит дополнительным источником факторов роста и жирных кислот. Низкое значение pH среды, равное 3,7 и достигаемое добавлением L-яблочной кислоты, подавляет рост ряда бактериальных видов.

При инкубации при 45 °C K-агар поддерживает рост преобладающего вида A. acidoterrestris и ограниченный рост других видов.

Методика выделения и культивирования

1. Если образец пригоден для фильтрования, после предварительной обработки пропустите его через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
2. Выполните фильтрование в асептических условиях.
3. Перенесите одну мембрану на K-агар, а другую — на YSG-агар M1753.
4. Одновременно выполните посев стандартных культур Alicyclobacillus acidoterrestris и Alicyclobacillus acidocaldarius для сравнения.
5. Инкубируйте посевы при температуре 45 ± 1 °C в течение 2–5 суток.
6. Осматривайте посевы ежедневно. Подробная процедура приведена в стандартном методе IFU № 12.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель бледно-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция 2,45%-ного водного раствора при 25 °C; pH 3,7 ± 0,1.
• Диапазон pH: 3,60–3,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 45–46 °C в течение 2–5 суток.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Температура хранения, указанная в карточке товара: 10–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Методическая основа

Среда предназначена для применения по методу IFU № 12 «Микробиологическое обнаружение Alicyclobacillus во фруктовых соках».