Основа агара Борде-Жангу HiMedia M175-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Основа агара Борде-Жангу HiMedia M175-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для детекции и изоляции Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis при подозрении на коклюш.

Область применения

Среда используется для выделения культур Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis из клинических образцов: экстрактов глотки, секретов носоглотки и мазков из преддверия носа (в том числе при посеве методом «кашлевых пластинок»). Благодаря высокому содержанию питательных веществ среда поддерживает обильный рост видов Bordetella и может применяться для массового культивирования B. pertussis при производстве вакцин, а также для поддержания стоковых культур.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Борде-Жангу была разработана для культивирования видов Bordetella. Модификация состава (замена части крови человека или кролика на 15 % крови овец) делает среду более обогащенной для обнаружения B. pertussis за счёт гемолитической реакции. Обогащение базовой среды 25 % крови человека способствует обнаружению видов Mycobacterium при малых дозах инокулята мокроты, а также используется при тестировании чувствительности к стрептомицину.

Карбонидные и азотистые источники (настой картофеля и пептон) в сочетании с глицерином и кровью обеспечивают необходимый набор нутриентов, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Интерпретация результатов

• Сроки и условия: Инкубация проводится в увлажненной камере (влажность 60 %) при 37 °C до 7 суток.
• Морфология: Через 40 часов колонии B. pertussis выглядят гладкими, выпуклыми, блестящими с зоной гемолиза (некоторые штаммы могут быть негемолитическими).
• Подтверждение: Для окончательного подтверждения необходимо проведение серодиагностики и биохимических тестов.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Растворить 40,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C и асептически добавить 15–20 % стерильной свежей дефибринированной крови (овечьей, кроличьей, человеческой или лошадиной).
5. Для придания селективности асептически добавить содержимое 2 флаконов селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004).
6. Тщательно перемешать, избегая образования пузырьков воздуха, и разлить в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

1. Использовать стандартные процедуры изоляции B. pertussis из образцов.
2. Инкубировать пластины в увлажненной камере при 35–37 °C в течение 7 дней.
3. Ежедневно проводить осмотр (возможно с использованием диссекционного микроскопа при косом освещении).
4. При наличии разрастающихся колоний плесени, которые могут маскировать целевой микроорганизм, удалить пораженную часть агара стерильным скальпелем или иглой.
5. Если через 7 дней инкубации рост не обнаружен, пластины утилизируются как отрицательные.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Финальный pH (при 25 °C): 6,7 $\pm$ 0,2
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления глицерина и 15 % дефибринированной крови: вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 6,7 $\pm$ 0,2 (4 % водный раствор при 25 °C).
• Диапазон pH: 6,50–6,90.

Культуральные характеристики

Результаты получены с добавлением глицерина, 15 % стерильной дефибринированной крови и селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004) после инкубации при 35–37 °C в течение 3–4 суток.

Ограничения и предостережения

• Некоторые виды Haemophilus могут расти на данной среде и давать перекрестную реакцию с антисыворотками к B. pertussis; рекомендуется проверить зависимость от факторов X и V.
• Колонии B. pertussis могут быть не видны без микроскопа в течение первых 2–4 дней.
• Среда предназначена только для профессионального использования в In Vitro диагностике.
• Требуется использование средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации согласно лабораторным протоколам работы с инфекционными материалами.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляется:

• FD004 Bordetella Selective Supplement / Селективная добавка для бордетелл