HiMedia M1743-500G Модифицированный агар R2A

Модифицированный агар HiMedia M1743-500G предназначен для количественного определения и культивирования бактерий из питьевой воды; форма выпуска — порошок массой 500 г. Питательная среда применяется для гетеротрофного подсчёта бактерий методами глубинного и поверхностного посева, а также мембранной фильтрации, при конечном pH 7,2 ± 0,2.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для количественного определения и культивирования бактерий из питьевой воды. Гетеротрофное микробное число (HPC), ранее называвшееся стандартным микробным числом, используется для оценки количества живых бактерий в воде и контроля изменений при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах.

Модифицированный агар R2A относится к низкопитательным средам. Более длительная инкубация на низкопитательной среде способствует росту повреждённых и стрессированных микроорганизмов по сравнению с высокопитательными средами. По данным производителя, по сравнению с триптон-глюкозным агаром и агаром для стандартных методов агар R2A обеспечивает улучшенное восстановление стрессированных и устойчивых к хлору бактерий из систем питьевого водоснабжения.

Среда применяется в стандартных методиках:

• глубинного посева;
• поверхностного посева;
• мембранной фильтрации.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Ферментативный гидролизат казеина, ферментативный перевар животной ткани, кислотный гидролизат казеина и дрожжевой экстракт обеспечивают растущие микроорганизмы источниками азота, углеводов, витаминов, минеральных веществ и факторов роста.

Функции компонентов среды:

• глюкоза служит источником углерода;
• растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов, связывая токсичные побочные продукты метаболизма;
• пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток;
• магния сульфат является источником двухвалентных катионов и сульфата;
• дикалия фосфат используется для стабилизации pH среды;
• агар выполняет функцию отверждающего компонента.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 18,12 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на квадратный дюйм соответствует приблизительно 0,10 МПа.

Методика гетеротрофного подсчёта

1. Приготовьте серию разведений исследуемой пробы.
2. Для выделения микроорганизмов используйте один из методов: поверхностный посев, глубинный посев или мембранную фильтрацию.
3. При поверхностном или глубинном посеве используйте не более 1 мл пробы.
4. Учтите, что объём пробы для мембранной фильтрации отличается от объёма, используемого при поверхностном или глубинном посеве.
5. Инкубируйте чашки при 35–37 °C не менее 72 ч.
6. При инкубации при 20–28 °C выдерживайте чашки 5 суток.
7. Оптимальное время инкубации в обоих температурных режимах составляет 5–7 суток.
8. При необходимости увеличьте продолжительность инкубации для восстановления дополнительных медленно растущих бактерий.
9. Результат выражайте в колониеобразующих единицах на миллилитр либо на единицу объёма исследуемой пробы.

Глубинный посев используется реже, поскольку восстановление стрессированных бактерий может быть снижено из-за теплового шока при температуре 44–46 °C и низкого содержания кислорода, являющихся частью процедуры.

Технические характеристики

• Наименование: модифицированный агар R2A.
• Артикул: M1743-500G.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: агар, питательная микробиологическая среда.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Физическая форма: порошок.
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности, HDPE).
• Масса: 500 г.
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• pH 1,81 % водного раствора при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.
• Температура эксплуатации по данным каталога: 10–30 °C.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 1,81 % водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 35–37 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется дополнительная инкубация продолжительностью до 7 суток для подтверждения отсутствия микроорганизмов.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Отличие методики от стандартных высокопитательных сред

В отличие от триптон-глюкозного агара и агара для стандартных методов, модифицированный агар R2A использует низкопитательную рецептуру и более длительную инкубацию, что предназначено для восстановления повреждённых, стрессированных и устойчивых к хлору бактерий из питьевой воды.

Таблица характеристик производителя