HiMedia M1742-500G Основа агара с цетримидом (с 1.3% агара)

Основа агара с цетримидом (с 1,3 % агара) HiMedia M1742-500G — селективная питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa из различных материалов. Применяется для идентификации синегнойной палочки по способности вырабатывать пиоцианин и флуоресцеин; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда основана на использовании цетримида (N-ацетил-N-N,N-триметиламмоний бромид), который выступает в роли селективного агента. Цетримид является четвертичным аммониевым соединением и катионным детергентом, который снижает поверхностное натяжение в точке контакта, оказывая осаждающее, комплексующее и денатурирующее воздействие на белки мембран бактерий. Это подавляет рост большинства микроорганизмов, включая виды Pseudomonas, отличные от P. aeruginosa.

Хлорид магния и сульфат калия стимулируют выработку пиоцианина — сине-зелёного пигмента, который диффундирует в среду, что облегчает обнаружение Pseudomonas. Ионы магния также нейтрализуют ЭДТА, если он присутствует в пробе. Желатиновый пептон обеспечивает необходимые питательные вещества, а глицерин/глицерол служит источником углерода для медленного и непрерывного роста клеток.

Состав среды соответствует требованиям различных фармакопей (включая Британскую, Европейскую, Японскую и USP-NF), с уточнением концентрации агара до 1,3 %.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 44,7 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина/глицерола.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавить содержимое 1 флакона селективной добавки NA (FD130) на 1000 мл среды.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Посев и интерпретация

Для выделения P. aeruginosa рекомендуется проводить посев из неселективных сред, таких как бульон инфузия мозга и сердца (M210) или соево-казеиновая среда (M011). При высокой обсемененности пробы возможен прямой посев на агар с цетримидом.

Инкубацию проводят при температуре 37 °C в течение 18–24 часов.

• Положительный результат: колонии P. aeruginosa могут быть синими, сине-зелёными или беспигментными. Предположительно положительными считаются колонии с сине-зелёной пигментацией и флуоресценцией при 250 нм.
• Особенности: при кратковременном хранении культур при комнатной температуре флуоресценция под УФ-лучами может исчезнуть, но восстанавливается после повторной инкубации.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Назначение: Основа среды
• Финальный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный опалесцирующий гель с небольшим осадком в чашках Петри
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,3 % агаром

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки NA (FD130) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

(*) — соответствующие номера WDCM.

Область применения

Рекомендуется для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из клинических образцов (гной, моча).

Ограничения и предостережения

• Некоторые штаммы Pseudomonas, отличные от вида aeruginosa, могут демонстрировать плохой рост из-за высокой токсичности цетримида.
• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.