HiMedia M1742-100G Основа агара с цетримидом (с 1.3% агара)

Основа агара с цетримидом (с 1,3 % агара) HiMedia M1742-100G предназначена для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из различных материалов. Среда позволяет определять способность микроорганизмов вырабатывать пиоцианин и флуоресцеин.

Принцип измерения

Среда основана на использовании цетримида (N-ацетил-N-N,N-триметиламмоний бромид), который выступает в роли селективного агента. Цетримид является четвертичным аммониевым соединением и катионным детергентом, который снижает поверхностное натяжение в точке контакта, оказывая осаждающее, комплексирующее и денатурирующее воздействие на белки бактериальных мембран. Это подавляет рост большинства микроорганизмов, включая виды Pseudomonas, отличные от P. aeruginosa.

Хлорид магния и сульфат калия стимулируют выработку пиоцианина — сине-зелёного пигмента, который диффундирует в среду, что облегчает обнаружение Pseudomonas. Ионы магния также способны нейтрализовать ЭДТА, если он присутствует в пробе. Желатиновый пептон обеспечивает необходимые питательные вещества, а глицерин/глицерол служит источником углерода для медленного и непрерывного роста клеток.

Состав среды соответствует требованиям различных фармакопей (включая Британскую, Европейскую, Японскую и Фармакопею США), с уточнением концентрации агара до 1,3 %.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. {Suspend} Растворите 44,7 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина/глицерола.
2. Нагрейте смесь до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавьте 1 флакон селективной добавки NA (FD130) на 1000 мл среды.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Посев и интерпретация

Для выделения P. aeruginosa рекомендуется проводить посев с неселективных сред, таких как бульон инфузия сердца и мозга (M210) или соево-казеиновый digested-агар (M011). При высокой обсемененности пробу можно наносить непосредственно на агар с цетримидом.

Инкубацию проводят при температуре 37 °C в течение 18–24 часов.

Оценка результатов:

• Колонии P. aeruginosa могут быть синими, сине-зелёными или беспигментными.
• Предположительно положительный результат: колонии с сине-зелёной пигментацией и флуоресценцией при 250 нм.
• При кратковременном хранении при комнатной температуре флуоресценция под УФ-лучами может исчезнуть; она восстанавливается после повторной инкубации.
• Характерный запах аминоцетофенона (напоминает запах винограда) подтверждает идентификацию.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Вес упаковки: 100 г

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,3 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный опалесцирующий гель с небольшим осадком в чашках Петри.
• Реакция: pH 7,0 $\pm$ 0,2 (для 4,47 % водного раствора с 1,0 % глицерола при 25 °C).
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением селективной добавки NA (FD130) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

(*) Соответствующие номера WDCM.

Область применения

• Типы образцов: клинические материалы (гной, моча).
• Назначение: селективный поиск и выделение P. aeruginosa.

Ограничения и предостережения

1. Некоторые штаммы Pseudomonas, отличные от вида aeruginosa, могут демонстрировать плохой рост из-за высокой токсичности цетримида.
2. Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
3. Только для диагностики in vitro и профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать бутылку во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты должны быть уничтожены путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.