HiMedia M1739-100G Основа A7 агара (дифференциальный агар Шепарда)

Сухая питательная среда HiMedia M1739-100G Основа A7 агара (дифференциальный агар Шепарда) для культивирования и дифференциации Ureaplasma urealyticum из мочи. Применяется для выделения видов Ureaplasma на основе их способности расщеплять мочевину с образованием аммиака.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для селективного культивирования урогенитальных микоплазм, в частности Ureaplasma urealyticum, из клинических образцов. Принцип дифференциации основан на способности данных микроорганизмов вырабатывать фермент уреазу, которая расщепляет мочевину до аммиака.

Технические особенности состава:

• Триптон и соевый пептон: источники азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Экстракт дрожжей: обеспечивает предшественники нуклеиновых кислот, необходимые для роста требовательных видов Ureaplasma.
• Глюкоза: источник углеводов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Сыворотка и антибиотики: необходимы для обеспечения оптимального роста микоплазм и подавления контаминирующей микрофлоры.

Интерпретация результатов: бактерии, производящие аммиак, образуют колонии от золотистого до темно-коричневого цвета.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,0 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Подготовка среды

1. Суспендируйте 40,88 г порошка в 790 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте следующие компоненты:
   • 195 мл стерильной сыворотки лошади (RM1239);
   • 1 флакон раствора U (FD253) (стерилизованного фильтрованием);
   • по 1 флакону регидратированных добавок: селективная добавка PG (FD254) и обогащающая добавка GroVitAm (FD255).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по чашкам Петри.

Работа с образцами

• Тип образца: клинические образцы (моча).
• Сбор и транспортировка должны осуществляться в соответствии с установленными руководствами по работе с биоматериалом.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый раствор от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• Реакция: pH 6,0 ± 0,2 (для 4,08 % водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 5,80–6,20.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением RM1239, FD253, FD254, FD255.

Область применения и ограничения

Среда используется для профессиональной диагностики in vitro.

Ограничения:

• Несмотря на селективность среды в отношении грамотрицательных организмов, для окончательной идентификации рекомендуется проведение биохимических и серологических тестов с использованием чистых культур.
• Для избежания ошибочной интерпретации результатов необходимо строго соблюдать рекомендуемый температурный режим и время инкубации.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.