Компонент питательной среды HiMedia M1736I-500G Основа RPF агара — порошковая основа для приготовления агара с фибриногеном кроличьей плазмы, рассчитанная на 90 мл готовой среды. HiMedia M1736I-500G применяется для количественного определения коагулазоположительных стафилококков в пищевых продуктах и кормах для животных; рабочий диапазон хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Основа RPF агара предназначена для количественного определения коагулазоположительных стафилококков в пищевых продуктах и кормах для животных. Состав и критерии эффективности соответствуют ISO 6888-2:1999/Amd 2:2018 и ISO 11133:2014 (E)/Amd.:2020.

Состав среды

Основа RPF агара

Состав приведён для 1 л среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Триптон эквивалентен панкреатическому перевариванию казеина.

Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту.

Ингибитор FPT

Содержимое одного флакона ингибитора FPT (FD195) предназначено для 90 мл среды.

Методика приготовления среды

1. Приостановите 5,80 г основы в 90 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона ингибитора FPT (FD195).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип измерения и интерпретация

Основа RPF агара работает по тому же принципу, что и агар Байрд—Паркера, но содержит фибриноген плазмы, трипсин и теллурит калия в составе одной добавки. Агар Байрд—Паркера был разработан Baird Parker на основе теллурит-глициновой формулы Zebovitz и предназначен для выделения и количественного определения стафилококков в пищевых продуктах и других материалах, поскольку обеспечивает хорошую дифференциацию коагулазоположительных штаммов.

Состав среды установлен в соответствии с ISO 6888-1, а испытания выполняются согласно ISO 11133:2014. Исследования показывают, что почти 100 % коагулазоположительных стафилококков способны восстанавливать теллурит с образованием чёрных колоний, тогда как другие стафилококки не всегда обладают такой способностью.

Функции компонентов:

• триптон, экстракт HM и дрожжевой экстракт являются источниками азота, углерода, серы и витаминов;
• пируват натрия защищает повреждённые клетки, способствует их восстановлению и стимулирует рост Staphylococcus aureus, снижая селективность среды;
• хлорид лития и теллурит калия подавляют большинство сопутствующей микрофлоры, за исключением Staphylococcus aureus;
• теллурит окрашивает колонии в чёрный цвет;
• глицин и пируват усиливают рост Staphylococcus;
• ингибитор FPT обеспечивает выявление коагулазной активности.

Наличие ореола непрозрачности и серо-чёрных колоний на этой среде является диагностическим признаком коагулазоположительных стафилококков.

Тип образца

• Пищевые продукты.
• Корма для животных.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам (4, 5). После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые варианты роста на этой среде.
2. Каждая серия среды проверена на стандартных штаммах; незначительные различия в росте могут зависеть от источника выделения микроорганизма.
3. Штаммы бычьего происхождения, в частности, не всегда образуют указанную зону; требуется подтверждающее тестирование.

Эффективность и оценка

Ожидаемая эффективность среды обеспечивается при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 5,8%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральная реакция

Продуктивность

Культуральную реакцию наблюдали с добавлением ингибитора FPT (FD195) после инкубации при 35 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч. Степень восстановления принята равной 100 % для роста бактерий на референсной среде — соево-казеиновом агаре.

Специфичность

Культуральную реакцию наблюдали с добавлением ингибитора FPT (FD195) после инкубации при 35 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

Селективность

Культуральную реакцию наблюдали с добавлением ингибитора FPT (FD195) после инкубации при 35 ± 1 °C в течение 48 ± 2 ч.