HiMedia M1736I-500G Основа RPF агара

Основа питательной среды RPF агар HiMedia M1736I-500G для подсчета коагулазеположительных стафилококков. Применяется для анализа пищевых продуктов и кормов для животных в соответствии со стандартами ISO 6888-2:1999/Amd 2:2018 и ISO 11133:2014 (E)/Amd.:2020.

Принцип измерения

Среда на основе RPF агара работает по принципу агара Бэрда-Паркера с добавлением комплекса FPT-ингибитора (фибриноген плазмы, трипсин и теллурит калия). Почти 100 % коагулазеположительных стафилококков способны восстанавливать теллурит, что приводит к образованию черных колоний.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Триптон, экстракт HM и дрожжевой экстракт: источники азота, углерода, серы и витаминов.
• Пируват натрия: защищает поврежденные клетки, способствует их восстановлению и стимулирует рост Staphylococcus aureus.
• Хлорид лития и теллурит калия: ингибируют рост большинства сопутствующей микрофлоры.
• Глицин и пируват: усиливают рост стафилококков.
• FPT-ингибитор: позволяет определить коагулазную активность.

Диагностическим признаком коагулазеположительных стафилококков на данной среде являются серо-черные колонии с матовым (непрозрачным) ореолом.

Состав

Основа RPF агара (RPF Agar Base)

Значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

FPT-ингибитор (FD195) на один флакон (для 90 мл среды)

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 5,80 г основы в 90 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C и асептически добавьте один флакон FPT-ингибитора (FD195).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (для 5,8 % водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Результаты получены при использовании среды с добавлением FPT-ингибитора (FD195) после инкубации при 35 ± 1 °C в течение 24 ± 2 или 48 ± 2 часов.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для анализа проб пищевых продуктов и кормов для животных.

Ограничения:

• Требования к росту отдельных организмов могут различаться, что приводит к вариативности паттернов роста.
• Возможны незначительные отклонения в росте в зависимости от источника выделения микроорганизма.
• Штаммы, выделенные из организма крупного рогатого скота, не всегда образуют диагностический ореол, что требует проведения подтверждающих тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников воспламенения.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание комкования.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.