Основа агара для селективного подсчета бифидобактерий HiMedia M1734-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды HiMedia M1734-500G Основа агара для селективного подсчета бифидобактерий HiMedia M1734-500G (уп/500 гр) — порошкообразная среда для селективного подсчёта предполагаемых бифидобактерий методом подсчёта колоний. Применяется для анализа молочных продуктов, включая ферментированные молочные продукты и напитки, с инкубацией в анаэробных условиях при 37 °C в течение 72 ч ± 3 ч.

Назначение

Основа агара предназначена для селективного подсчёта предполагаемых бифидобактерий методом подсчёта колоний в молочных продуктах.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип образца: молочные продукты
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Соответствие: ГОСТ ISO 29981-2013
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 500 г

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 6,3 ± 0,2
• Реакция: реакция 6,20 % масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 6,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,10–6,50

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа агара для селективного подсчёта бифидобактерий предназначена для селективного количественного определения бифидобактерий в ферментированных молочных продуктах и ферментированных молочных напитках, содержащих молочнокислые бактерии.

Принцип действия компонентов среды:

• галактоолигосахариды высокой степени очистки служат питательными веществами, способствующими росту бифидобактерий;
• гидрохлорид цистеина формирует восстановленные условия, необходимые для роста бифидобактерий;
• триптон является источником азота;
• антибиотик мупироцин подавляет рост большинства молочнокислых бактерий, обычно используемых в ферментированных и неферментированных молочных продуктах.

Рекомендуется использовать свежеприготовленную питательную среду, не подвергавшуюся воздействию прямых солнечных лучей.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 62,35 г сухой обезвоженной среды на 1 л в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 115 ± 3 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для селективного выделения бифидобактерий добавьте содержимое 2 флаконов селективной добавки Mup Selective Supplement (FD250).
6. Осторожно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри или распределите другим предусмотренным способом.

Среда чувствительна к нагреванию, поэтому чрезмерная тепловая обработка может повлиять на её свойства.

Для повышения селективности допускается дополнительное внесение ледяной уксусной кислоты — 1 % селективной добавки Glacic Selective Supplement B (FD251). После добавления 1 % селективной добавки FD251 pH среды смещается в кислую область; это не влияет на рабочие характеристики среды.

Методика проведения анализа

1. До открытия контейнера с образцом очистите внешнюю поверхность вокруг участка, из которого будет отбираться проба, чтобы удалить материалы, способные вызвать загрязнение образца.
2. Взвесьте по 90 г разбавителя в каждую предварительно стерилизованную бутылку вместимостью 250 мл.
3. Закройте бутылки.
4. Внесите непосредственно в бутылку с разбавителем 10 г исследуемого образца при температуре 45 °C.
5. Для растворения образца медленно вращайте бутылку, чтобы порошок смочился.
6. Период между окончанием приготовления первичного разведения и внесением питательной среды не должен превышать 15 мин.
7. Сразу после затвердевания среды переверните все чашки Петри и поместите их в анаэробный сосуд для культивирования или анаэробный инкубатор.
8. Инкубируйте при 37 °C в течение 72 ч ± 3 ч.
9. После инкубации подсчитайте колонии.

Колонии бифидобактерий распознают по беловатой окраске и запаху уксусной кислоты. Некоторые штаммы бифидобактерий могут формировать на одной чашке колонии разного размера и внешнего вида.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки Bifido Selective Supplement A, в анаэробных условиях, после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется жёлтый опалесцирующий гель.
• Реакция: реакция 6,20 % масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 6,3 ± 0,2.
• pH: 6,10–6,50.

Отбор и обращение с образцами

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Некоторые бифидобактерии являются чрезвычайно требовательными к условиям культивирования и могут демонстрировать слабый рост из-за различий в питательных потребностях и селективности среды.
2. Для полной идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические исследования.
3. Избыточная тепловая обработка среды может повлиять на её свойства.
4. После добавления селективной добавки FD251 pH среды смещается в кислую область, что не влияет на рабочие характеристики среды.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Контейнер: плотно закрытый.
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Требование к помещению: сухая, проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После использования: плотно закрывать контейнер.
• Причина образования комков: гигроскопичность продукта и ненадлежащее хранение.
• Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами:

• используйте защитные перчатки;
• носите защитную одежду;
• применяйте защиту глаз и лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• выполняйте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с исследуемыми образцами;
• руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами.

Технические характеристики