HiMedia M173-5KG Агар Мюллера-Хинтона

Сухая питательная среда агар Мюллера-Хинтона HiMedia M173-5KG для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным агентам. Применяется для анализа клинических образцов; вес упаковки составляет 5 кг.

Принцип измерения и интерпретация

Агар Мюллера-Хинтона разработан как прозрачная среда для культивирования патогенных видов Neisseria, однако в настоящее время широко используется в качестве стандартной среды для тестирования чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Среда рекомендована для диффузии антимикробных агентов, импрегнированных на бумажные диски, через агарный гель согласно стандартам CLSI.

Выбор данной формуляции обусловлен следующими факторами:

• высокая воспроизводимость результатов от серии к серии;
• низкое содержание ингибиторов тетрациклина, триметоприма и сульфонамидов;
• поддержка роста большинства нетребовательных бактериальных патогенов;
• наличие обширной базы данных и опыта эксплуатации.

Компоненты HM infusion B и ациказа обеспечивают организм азотистыми соединениями, углеродом, серой и другими важными питательными веществами. Крахмал выступает в роли защитного коллоида против токсических веществ, присутствующих в среде, а его гидролиз дает декстрозу, служащую источником энергии. Ингредиенты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина, что подтверждено значениями минимальной подавляющей концентрации (МПК) для Enterococcus faecalis с сульфаметоксазолом и триметопримом (SXT).

Метод Кирби-Бауэра основан на диффузии антимикробных веществ из бумажных дисков в агар. Диаметры зон торможения роста, наблюдаемые при использовании дисков с фиксированной концентрацией агента, коррелируют со значениями МПК.

Область применения

Среда используется для работы с клиническими образцами: чистыми культурами, выделенными из мочи, кала, крови и других биоматериалов.

Ограничения применения

• не подходит для метода диффузии с медленно растущими организмами, анаэробами и капнофилами (длительная инкубация может привести к деградации антибиотика и неточным результатам);
• плотность посевной дозы влияет на размер зоны: избыточный инокулят может привести к уменьшению зон, а недостаточный — к их увеличению;
• требовательные организмы могут не расти на данной среде без добавления крови;
• результаты in vitro могут не всегда совпадать с эффективностью препарата in vivo.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 38,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,1

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,7 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,20–7,40 (водный раствор 3,8 % масс./об. при 25 °C).

Культуральный ответ и чувствительность к антибиотикам

Тесты проводятся в соответствии с ISO/TS 16782, а также руководствами CLSI/EUCAST. Для тестирования S. pneumoniae и H. influenzae среда дополняется 5 % кровью лошади и 20 мг/л НАД, инкубируется при 34–36 °C в течение 18–20 часов в атмосфере 5 % CO₂.

Результаты тестирования стандартных штаммов ATCC (инкубация 30–35 °C в течение 18 часов согласно протоколу CLSI M6 и стандартам M100):