HiMedia M173-2.5KG Агар Мюллера-Хинтона

Сухая питательная среда HiMedia M173-2.5KG Агар Мюллера-Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным агентам. Применяется для анализа клинических образцов; вес упаковки составляет 2,5 кг.

Область применения

Рекомендуется для определения чувствительности к антимикробным препаратам микроорганизмов, выделенных из клинических образцов (моча, кал, кровь и др.). Среда используется для диффузии антимикробных агентов, импрегнированных на бумажные диски, через агаргель согласно стандартам CLSI.

Принцип измерения и интерпретация

Агар Мюллера-Хинтона разработан как прозрачная среда для культивирования патогенных видов Neisseria и широко используется для определения резистентности гонококков и других организмов к сульфаниламидам.

Среда выбрана CLSI по следующим причинам:

• Высокая воспроизводимость результатов от серии к серии.
• Низкое содержание ингибиторов сульфаниламидов, триметоприма и тетрациклина.
• Поддержка роста большинства нетребовательных бактериальных патогенов.
• Наличие обширного массива данных и опыта эксплуатации.

Компоненты и их функции:

• Инфузорий HM B и ациказе: обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу и другие необходимые питательные вещества.
• Крахмал: выступает в роли защитного коллоида против токсических веществ, присутствующих в среде; при гидролизе дает декстрозу, которая служит источником энергии.
• Состав оптимизирован для низкого содержания тимина и тимидина (подтверждено значениями МИК для Enterococcus faecalis с сульфаметоксазолом и триметопримом (SXT)).

Метод Кирби-Бауэра основан на диффузии антимикробных веществ из бумажных дисков в агар. Диаметры зон заторможенного роста коррелируют со значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

Методика приготовления и использования

1. Растворить 38,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Ограничения применения

• Среда предназначена только для тестирования чистых культур.
• Не подходит для диффузионного метода с медленно растущими организмами, анаэробами и капнофилами (длительная инкубация может привести к деградации антибиотика и неточным результатам).
• Требовательные организмы могут не расти на данной среде и требовать добавления крови.
• Плотность посевной дозы влияет на размер зоны: избыточный инокулят может привести к уменьшению зон, недостаточный — к их увеличению.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,1.

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,7% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Диапазон pH: 7,20–7,40.

Контроль качества и культуральные характеристики

Тесты на чувствительность к антибиотикам выполняются в соответствии с ISO/TS 16782, а также руководствами CLSI/EUCAST.

Особые условия для специфических патогенов:

• Для S. pneumoniae и H. influenzae: среда дополняется 5 % конской кровью и 20 мг/л НАД, инкубируется при 34–36 °C в течение 18–20 часов в атмосфере 5 % CO₂.

Результаты тестов на чувствительность к антибиотикам

Инкубация при 30–35 °C в течение 18 часов (согласно протоколу CLSI M6 и стандартам M100).