HiMedia M173-100G Агар Мюллера-Хинтона

Сухая питательная среда HiMedia M173-100G Агар Мюллера-Хинтона, предназначенная для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным агентам. Рекомендуется для работы с чистыми культурами, выделенными из клинических образцов; вес упаковки составляет 100 г.

Область применения

Среда используется для определения чувствительности бактериальных патогенов к антибиотикам и другим антимикробным препаратам. Агар Мюллера-Хинтона является стандартом для диффузионного метода с использованием бумажных дисков, так как обладает высокой воспроизводимостью от партии к партии и низким содержанием ингибиторов сульфаниламидов, триметоприма и тетрациклина.

Принцип измерения

Метод основан на диффузии антимикробного вещества из бумажного диска в агаровый гель. Вокруг диска с антибиотиком образуется зона задержки роста (зона ингибирования), диаметр которой коррелирует со значениями минимальной подавляющей концентрации (МПК) препарата.

Компоненты среды:

• Инфузия HM B и ациказа: обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу и другие основные питательные вещества.
• Крахмал: выполняет роль защитного коллоида против токсических веществ, присутствующих в среде; при гидролизе дает декстрозу, служащую источником энергии.
• Состав оптимизирован для обеспечения низкого содержания тимина и тимидина, что критично для точности определения МПК сульфаметоксазола-триметоприма (SXT) для Enterococcus faecalis.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа (метод Кирби-Бауэра)

1. Подготовьте стандартизированную суспензию исследуемого микроорганизма.
2. Равномерно нанесите суспензию зигзагообразными движениями на всю поверхность поверхности агара.
3. Поместите на поверхность среды бумажные диски, пропитанные определенным количеством антимикробного агента.
4. Инкубируйте чашки при температуре 30–35 °C в течение 18 часов.
5. Измерьте диаметр зон задержки роста вокруг каждого диска и определите чувствительность путем сравнения с данными стандартов CLSI.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,1
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Свойства геля: плотный, сопоставим с 1,7% агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель

Дополнительные параметры:

Контроль качества и интерпретация

Культуральные характеристики

Тесты на чувствительность к антибиотикам проводятся в соответствии с ISO/TS 16782 и руководствами CLSI/EUCAST.

Особые условия для требовательных организмов:

• Для S. pneumoniae и H. influenzae: среда дополняется 5 % кровью лошади и 20 мг/л НАД, инкубация при 34–36 °C в течение 18–20 часов в атмосфере с 5 % CO₂.

Результаты тестирования стандартных штаммов (инкубация 30–35 °C, 18 ч)