HiMedia M1727-500G Основа агара МакКонки с сорбитолом и рамнозой

Основа сухой питательной среды HiMedia M1727-500G (агар МакКонки с сорбитолом и рамнозой) предназначена для улучшенной дифференциации Escherichia coli O157:H7 от фоновой микрофлоры. Применяется для выделения и идентификации колиформ в клинических, пищевых, молочных и водных пробах; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на способности различных штаммов E. coli ферментировать сахара. Геморрагический штамм E. coli O157:H7, являющийся патогеном, вызывающим геморрагический колит, обычно не ферментирует сорбитол и рамнозу.

В составе среды присутствуют два сахара: сорбитол и рамноза.

• E. coli O157:H7 не ферментируют эти сахара и образуют бесцветные или соломенно-желтые колонии.
• Штаммы, положительные по рамнозе и отрицательные по сорбитолу, образуют розовые или красные колонии и не должны учитываться как предполагаемые E. coli O157:H7.

Пептон обеспечивает необходимые питательные вещества. Кристаллический фиолетовый и смесь желчных солей подавляют рост грамположительных бактерий. Добавление цефиксима значительно снижает количество сорбитол-отрицательных микроорганизмов, что облегчает выделение E. coli O157:H7. Подтверждение изолированных колоний может быть выполнено с помощью латекс-теста LK13.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое 2 флаконов добавки цефиксима (Cefixime Supplement FD246), предварительно регидратированных.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии, моча, гной.
• Образцы пищевой и молочной продукции.
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Финальный pH (при 25 °C): 7,1 ± 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурно-красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,1 ± 0,2 (для 5,65 % водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

1. Некоторые штаммы E. coli O157:H7 могут быть положительными по рамнозе и отрицательными по сорбитолу, образуя розовые или красные колонии; такие колонии не следует считать предполагаемыми E. coli O157:H7.
2. Для окончательной идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.
3. Только для диагностики in vitro. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и используйте средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Утилизация

Использованные или непригодные препараты должны быть подвергнуты автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными процедурами по утилизации инфекционных материалов.