HiMedia M1727-500G Основа агара МакКонки с сорбитолом и рамнозой

Основа питательной среды HiMedia M1727-500G Основа агара МакКонки с сорбитолом и рамнозой — порошковый компонент массой 500 г для приготовления селективно-дифференциальной среды. Среда предназначена для улучшенной дифференциации Escherichia coli O157:H7 от фоновой микрофлоры, при этом окончательная идентификация требует дополнительных биохимических и серологических испытаний.

Назначение

Основа агара МакКонки с сорбитолом и рамнозой применяется для улучшенной дифференциации Escherichia coli O157:H7 от фоновой микрофлоры.

Типы исследуемых образцов:

• клинические образцы: фекалии, моча, гной;
• пищевые и молочные продукты;
• образцы воды.

Состав

Формула рассчитана на 1 л среды и скорректирована, а также стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

E. coli O157:H7 — патогенный для человека микроорганизм, ассоциированный с геморрагическим колитом, развитие которого связано с действием шигоподобного токсина.

Агары МакКонки относятся к селективным средам и рекомендуются в качестве дифференциальных сред для выделения и обнаружения колиформных бактерий из различных образцов, включая клинический материал, молочные продукты, пищевые продукты, воду и фармацевтическую продукцию.

Штамм E. coli O157:H7, относящийся к геморрагическим штаммам, обычно не ферментирует сорбитол и рамнозу. Это биохимическое свойство позволяет дифференцировать E. coli O157:H7 от других штаммов E. coli. На стандартном агаре МакКонки с лактозой E. coli O157:H7 обычно невозможно отличить от других лактозоферментирующих штаммов E. coli. Большинство сорбитол-отрицательных штаммов Escherichia coli других серогрупп часто ферментируют рамнозу.

Основа агара МакКонки с сорбитолом и рамнозой содержит два углевода: сорбитол и рамнозу. Поскольку E. coli O157:H7 обычно не ферментирует ни сорбитол, ни рамнозу, колонии этого микроорганизма имеют бесцветную или соломенно-жёлтую окраску.

Рамнозоположительные и сорбитолотрицательные микроорганизмы образуют колонии розового или красного цвета; такие колонии не следует учитывать как предположительные колонии Escherichia coli O157:H7.

Пептон в составе среды обеспечивает растущие клетки необходимыми питательными веществами. Кристаллический фиолетовый и смесь солей желчных кислот подавляют рост грамположительных бактерий. Добавление цефиксима существенно уменьшает количество сорбитолонеферментирующих микроорганизмов, которые необходимо исследовать при предполагаемом выделении E. coli O157:H7.

Выделенные на этой среде подозрительные колонии E. coli O157:H7 могут быть дополнительно подтверждены с использованием набора для латекс-теста E. coli LK13.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 56,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 2 флаконов добавки цефиксима FD246.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Условия приготовления раствора для контроля реакции: водный раствор концентрацией 5,65 % масс./объём при 25 °C
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время стерилизации: 15 мин
• Давление при автоклавировании: 15 фунтов, ориентировочно ≈0,103 МПа
• Температура охлаждения перед внесением добавки: 45–50 °C
• Добавка: восстановленное содержимое 2 флаконов цефиксимовой добавки FD246

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 5,65 % масс./объём при 25 °C соответствует pH 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

1. Некоторые штаммы E. coli O157:H7 являются рамнозоположительными и сорбитолотрицательными; они образуют колонии розового или красного цвета, которые не следует учитывать как предположительные колонии Escherichia coli O157:H7.
2. Для полной идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические испытания.
3. Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности для получения указаний по безопасной работе.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём авт