HiMedia M169F-500G Основа HI агара с дрожжевым экстрактом

Питательная среда HiMedia M169F-500G Основа HI агара с дрожжевым экстрактом — порошковая основа для выделения и культивирования Campylobacter. Применяется в микробиологическом анализе пищевых и клинических образцов с добавлением стерильной дефибринированной крови и селективных добавок; хранение сухой среды — при температуре ниже 30 °C.

Назначение

Основа HI агара с дрожжевым экстрактом применяется для выделения и культивирования Campylobacter в соответствии с FDA BAM 1998.

Среда предназначена для селективного выделения и дифференциации видов Campylobacter. Для получения селективной среды к основе добавляют 5–7 % стерильной дефибринированной крови, добавку для роста Campylobacter FD009 и селективную добавку Campylobacter Abeyta FD294.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик. Основа эквивалентна настою из говяжьего сердца.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Campylobacter — микроаэрофильные, очень мелкие, изогнутые тонкие грамотрицательные палочки размером 1,5–5 мкм со штопорообразной подвижностью. Campylobacter считаются одной из ведущих причин кишечных заболеваний в США и других развитых странах. Бактерии могут вызывать диарею от лёгкой до тяжёлой степени: жидкий водянистый стул часто сменяется кровянистой диареей. Инфекция в целом называется кампилобактериозом.

Campylobacter обитают в кишечном тракте многих диких и домашних животных, особенно птиц, и часто загрязняют пищевые продукты животного происхождения.

Основа HI агара с дрожжевым экстрактом используется для селективного выделения и дифференциации видов Campylobacter в соответствии с FDA BAM 1998. Первоначально для выделения Campylobacter применяли кровь. Требовательные микроорганизмы с особыми пищевыми потребностями могут культивироваться на инфузионных средах, что было продемонстрировано Huntoon. Жидкая среда, содержащая мясной настой, относится к первым средам, применявшимся для культивирования бактерий.

Содержащий мясной настой агар с сердечным настоем используют для выделения и культивирования широкого спектра требовательных микроорганизмов, включая виды Vibrio. После добавления крови сердечно-настойный агар может применяться для изучения гемолитических реакций.

Триптоза и настой из говяжьего сердца обеспечивают питательные потребности патогенных бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Согласно протоколу BAM, при необходимости образцы предварительно обогащают в подходящих средах в микроаэробных условиях в течение соответствующего времени при 37 °C. Полученные обогащённые культуры дополнительно используют для выделения, идентификации и подтверждения.

Для выделения соответствующим образом разведённые образцы высевают на одну из следующих сред:

• основу HI агара с дрожжевым экстрактом M169F с добавлением FD294 и/или FD009;
• основу селективного агара для Campylobacter без крови и без дрожжевого экстракта M887F с добавлением FD067.

Чашки инкубируют при 37–42 °C в анаэробных условиях, защищая от света. Колонии Campylobacter на агаре имеют округлую или неправильную форму с гладкими краями. Рост может быть плотным, полупрозрачным, белого цвета, либо распространяющимся плёнкообразным прозрачным ростом. Полученные культуры дополнительно подтверждают микроскопией и биохимическими тестами.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,00 г порошка в 475 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Проверьте конечный pH: 7,4 ± 0,2.
5. При необходимости добавьте 25 мл стерильной лизированной крови лошади.
6. Добавьте по одному флакону добавки для роста Campylobacter FD009 и селективной добавки Campylobacter Abeyta FD294.
7. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.
8. Не подсушивайте среду в вытяжном шкафу при открытых крышках чашек.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды:
  • базовая среда: гель светло-жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий;
  • после добавления 5–7 % масс./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется гель вишнёво-красного цвета, непрозрачный.
• Реакция: реакция 4,0%-ного масс./об. водного раствора при 25 °C.
• pH по спецификации: 7,20–7,60.
• Конечный pH: 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5–7 % масс./об. стерильной дефибринированной крови, добавки для роста Campylobacter FD009 и селективной добавки Campylobacter Abeyta FD294, после инкубации в атмосфере с пониженным содержанием кислорода при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Температурный диапазон, указанный в карточке: 10–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• pH по спецификации: 7,20–7,60

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Сравнительный контекст

В отличие от основы