Питательная среда для испытания антимикотиков Агар для испытания антимикотиков HiMedia M164-500G (уп/500 гр) — сухая агаровая среда для определения антифунгальной активности фармацевтических препаратов и других материалов. Среда применяется цилиндровым или дисковым методом, а её конечный pH составляет 5,5 ± 0,2.

Назначение и область применения

Среда предназначена для испытания антифунгальной активности фармацевтических препаратов и других материалов цилиндровым или дисковым методом.

• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: агар
• Тип образца: фармацевтические препараты
• Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения требуемых рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 5,5 ± 0,2

Приготовление среды

1. Суспендируйте 75,76 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин; ориентировочное давление — 0,103 МПа (примерно 1,03 бар, 15 фунтов на квадратный дюйм).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Антимикотическая активность определяется по зоне подавления роста тест-культуры вокруг источника препарата. Компоненты среды обеспечивают тест-культуру необходимыми питательными веществами и факторами роста, поэтому получаемое подавление роста связывают с действием антимикотического препарата, а не с истощением питательных компонентов.

Среда разработана для проведения испытаний с использованием основного и посевного слоёв при цилиндровом и дисковом методах. Фосфат обеспечивает буферное действие. Декстроза служит источником углерода и энергии. Сульфаты, витамины и факторы роста усиливают развитие тестовых микроорганизмов.

Методики испытания

Цилиндровый метод

Метод основан на диффузии антибиотика или другого антимикотического препарата из вертикальных стальных цилиндров, установленных на поверхности инокулированной агаровой среды. Вокруг цилиндра образуется зона подавления роста, размер которой зависит от концентрации препарата в цилиндре.

Для проведения испытания:

1. Используйте чашки Петри размером 20 × 100 мм.
2. Используйте цилиндры из нержавеющей стали или фарфора со следующими размерами:
   • наружный диаметр: 8 мм;
   • внутренний диаметр: 6 мм;
   • длина: 10 мм;
   • допуск по всем размерам: 0,1 мм.
3. Тщательно очистите цилиндры от всех загрязнений.
4. При испытании с основным и посевным слоями сначала дайте затвердеть основному слою.
5. Наложите посевной агар, содержащий необходимую концентрацию тестового микроорганизма.
6. Обычно используйте 21 мл основного слоя и 4 мл посевного слоя на чашку.
7. Как правило, на одну чашку устанавливают 6 цилиндров.
8. Размещайте цилиндры на инокулированных чашках на равном расстоянии друг от друга.
9. Внесите раствор испытуемого препарата в цилиндры и оцените зоны подавления роста после инкубации согласно принятой методике испытания.

Дисковый метод

Бумажные диски диаметром 9 мм пропитывают раствором антибиотика или антимикотического препарата и помещают на поверхность питательной среды. Раствор препарата также может наноситься на диск после его размещения на среде.

Для испытания допускается использовать чашки с одним слоем среды толщиной 2 мм. Остальные этапы выполняют аналогично цилиндровому методу.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до бежевого цвета.

Гелеобразование

• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

• Условия определения: реакция 7,57%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 5,5 ± 0,2.

Диапазон pH

• Диапазон pH: 5,30–5,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–30 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Aspergillus niger.

Требования к образцам и обращению

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора проб и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Используйте чашки со свежеприготовленной средой. Применение несвежих чашек может привести к ошибочным результатам.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду используйте свежей.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры безопасности

1. Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
2. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
3. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
4. При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
5. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты среды утилизируйте безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания.

Соблюдайте установленные лабораторные процедуры обращения с инфекционными материалами. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики и упаковка