Основной анаэробный агар HiMedia M1635-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основной анаэробный агар HiMedia M1635-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для культивирования анаэробных микроорганизмов, включая виды Bacteroides, и имеет конечный pH 7,0 ± 0,2. Среда применяется для анализа клинических образцов — мазков из зева, мокроты и фекалий; перед исследованием инокулированную культуру необходимо инкубировать 48 ч до осмотра и контакта с атмосферным воздухом.

Назначение

Основной анаэробный агар HiMedia M1635-500G рекомендован для роста анаэробных микроорганизмов, особенно видов Bacteroides и других требовательных анаэробов.

Тип образцов:

• клинические образцы;
• мазок из зева;
• мокрота;
• фекалии.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Bacteroides составляют значительную часть нормальной микрофлоры человека и преобладают в кишечном тракте. Как и другие анаэробы, эти микроорганизмы обычно являются условно-патогенными и могут вызывать различные инфекции в разных органах и тканях.

Наиболее распространённые инфекции, связанные с анаэробами, включают:

• плевропульмональные инфекции;
• внутрибрюшные инфекции;
• инфекции женского мочеполового тракта.

На долю Bacteroides приходится около одной трети всех анаэробных изолятов, выделяемых из различных инфекционных очагов.

Анаэробные базальные среды имеют высокую питательную ценность и поэтому рекомендуются для требовательных анаэробов, включая виды Bacteroides. Для роста анаэробных микроорганизмов необходимы восстановительные условия и отсутствие растворённого кислорода в среде. Строгие анаэробы получают энергию и промежуточные продукты метаболизма за счёт окислительных процессов с использованием акцепторов водорода, отличных от кислорода. Анаэробы не способны расти в среде, содержащей растворённый кислород.

Предварительное восстановление среды кипячением позволяет удалить растворённый кислород. В среду также могут добавляться восстановители, например тиогликолят или цистеин.

Функции компонентов среды:

• пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают источники азота и углерода, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества для роста;
• крахмал абсорбирует токсичные метаболиты, образующиеся в процессе роста;
• гемин и витамин K являются необходимыми факторами роста для видов Bacteroides;
• сукцинат натрия способствует улучшению роста видов Bacteroides;
• пируват натрия служит источником энергии, имитирует действие каталазы и разрушает следовые количества перекиси водорода, которая может образовываться при воздействии молекулярного кислорода на компоненты среды;
• аргинин и L-цистеин способствуют восстановлению и усилению роста некоторых анаэробов;
• аргинин, L-цистеин и дитиотреитол также выполняют функцию восстановителей.

Анаэробный базальный агар можно сделать селективным для грамотрицательных анаэробов добавлением:

• добавки для неспорообразующих анаэробов Non-spore Anaerobic Supplement (FD001);
• добавки для спорообразующих анаэробов G.N. Spore Anaerobic Supplement (FD002).

Для получения среды, селективной в отношении неспорообразующих анаэробов, используют добавку Non-spore Anaerobic Supplement (FD001).

Посев на анаэробный базальный агар можно выполнять непосредственно методом поверхностного штрихового посева.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,9 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов/кв. дюйм соответствует примерно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5–10 % стерильной дефибринированной крови лошади.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо простерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Инокулированную среду необходимо инкубировать полные 48 ч перед осмотром и до контакта инокулированной культуры с атмосферным воздухом.

Технические характеристики

• Тип продукта: стандартный.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: животное.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Масса упаковки: 500 г.
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
• Назначение изделия: агар.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базальная среда: прозрачный гель от светло-янтарного до слегка опалесцирующего цвета.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,6%-ного мас./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации с добавлением 5 % мас./об. стерильной дефибринированной крови при 35–37 °C в течение 18–48 ч в анаэробных условиях.

• Приведены соответствующие номера WDCM. Ранее Phocaeicola vulgatus был известен как Bacteroides vulgatus.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения комкования из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая, проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды рассчитаны на применение в течение указанного срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Фактическое отличие от базовых питательных агаров

В состав среды входят восстановительные компоненты — L-цистеин, DTT и пируват натрия, а также гемин, витамин K и сукцинат натрия, что определяет её применение для культивирования требовательных анаэробов; селективность для отдельных групп микроорганизмов достигается добавлением FD001 или FD002.