Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН (8.0) HiMedia M1632-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН (8.0) HiMedia M1632-500G. Применяется для анализа остаточного содержания антимикробных веществ в образцах мяса и органов с использованием тест-культур Bacillus subtilis (ATCC 6633) и Micrococcus luteus (ATCC 9341).

Область применения

Среда рекомендуется для выявления следовых количеств антимикробных компонентов (например, пенициллина, стрептомицина, сульфонамидов) в мышечной ткани и органах животных. В связи с тем, что разные антибиотики проявляют оптимальную активность в разных диапазонах pH, данная среда с pH 8,0 наиболее эффективна для анализа стрептомицина.

Принцип измерения

Метод основан на диффузии антимикробных веществ из образца ткани в агар. Если в образце присутствуют ингибиторы, они диффундируют в среду и подавляют рост посеянных тест-организмов, что приводит к образованию зоны торможения роста.

Методика анализа

Анализ может проводиться двумя способами:

1. Метод диффузии в агар:

• На посеянные поверхности агара помещают небольшие срезы образца мяса.
• Пластины инкубируют.
• При наличии антимикробных компонентов вокруг образца формируется зона подавления роста микроорганизмов.
• Для комплексного анализа используют три среды с разным pH: M1631 (pH 6,0), M1601 (pH 7,2) и M1632 (pH 8,0).

2. Метод четырех пластин (EEC Four-Plate-Test):

• В расплавленный и охлажденный агар вносят суспензию спор Bacillus subtilis (1) или культуру Micrococcus luteus, тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри.
• В одну половину пластины асептически помещают два небольших кусочка (2–8 мм) образца мяса или органа на определенном расстоянии друг от друга.
• Во вторую половину пластины помещают контрольные диски со стандартным антибиотиком (например, стрептомицин 10 мкг).
• Инкубируют пластины в течение 18–24 часов при температуре 30 °C (для B. subtilis) или 37 °C (для M. luteus).
• Измеряют диаметр зоны торможения между краем ткани и границей роста организма.

Интерпретация результатов:

• Зона $\ge$ 2 мм считается положительным результатом.
• Зона < 2 мм считается сомнительным результатом.
• Контрольный диск должен демонстрировать зону торможения не менее 6 мм.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендировать 26,07 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Внести в 1 литр стерильной охлажденной среды (50–56 °C) 1 мл суспензии спор Bacillus subtilis или культуры Micrococcus luteus (10⁴ КОЕ/мл).
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 8,0
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,3% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 8,00 (2,61% водный раствор при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики и зоны торможения определены после инкубации в течение 18–24 часов при 30 °C (B. subtilis) и 37 °C (M. luteus).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.