Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН (6.0) HiMedia M1631-500G (уп/500 гр)

Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН (6.0) HiMedia M1631-500G предназначен для анализа остаточных количеств антимикробных веществ в образцах мяса и органов. В качестве тест-организма используется Bacillus subtilis (ATCC 6633), при этом конечный pH среды составляет 6,00.

Область применения

Среда рекомендуется для выявления остаточных количеств антимикробных компонентов (например, пенициллина, стрептомицина и сульфонамидов) в образцах мышечной ткани и органов. Анализ проводится с использованием метода диффузии в агар или метода четырех чашек EEC (EEC Four-Plate-Test).

Принцип измерения

Определение основано на способности антимикробных соединений диффундировать из образца ткани в питательную среду, подавляя рост чувствительного тест-организма Bacillus subtilis. Это приводит к образованию зоны задержки роста вокруг образца.

Различные антибиотики проявляют оптимальную активность в разных диапазонах pH:

• Пенициллин G: оптимальная активность при pH 6,0 (среда M1631).
• Сульфонамиды: оптимальная активность при pH 7,2 (среда M1601).
• Стрептомицин: оптимальная активность при pH 8,0 (среда M1632).

Триптон и мясной экстракт в составе среды служат источниками углерода, азота и факторов роста, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Методика проведения анализа

Метод диффузии в агар

1. На подготовленные чашки с посеянным тест-организмом наносят небольшие срезы образца мяса.
2. Образцы инкубируют.
3. При наличии антимикробных компонентов в образце вокруг него образуется зона задержки роста.

Метод четырех чашек EEC (EEC Four-Plate-Test)

1. В расплавленный и охлажденный агар вносят суспензию спор Bacillus subtilis (1 мл на литр среды), тщательно перемешивают и разливают по чашкам Петри.
2. В одну половину чашки асептически помещают два небольших фрагмента (2–8 мм) образца мяса или органа на определенном расстоянии друг от друга.
3. Во вторую половину чашки помещают контрольные диски со стандартным антибиотиком (например, диски с 0,01 МЕ натриевой соли пенициллина G).
4. Чашки инкубируют при 30 °C в течение 18–24 часов.
5. После инкубации измеряют зону задержки роста между краем ткани и пределом роста тест-организма.

Интерпретация результатов:

• Положительный результат: зона задержки роста $\ge$ 2 мм.
• Сомнительный результат: зона задержки роста < 2 мм.
• Контрольный диск должен демонстрировать зону задержки не менее 6 мм.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 25 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В стерильную охлажденную среду (50–56 °C) внести по 1 мл суспензии спор Bacillus subtilis на литр среды.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,00
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,3% агаром.
• Цвет и прозрачность: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 2,5% водного раствора при 25 °C составляет 6,00.

Культуральные характеристики

Характеристики и зоны задержки роста определены после инкубации при 30 °C (для B. subtilis) и при 37 °C (для M. luteus) в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранить в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Готовую среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.