Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН (6.0) HiMedia M1631-500G (уп/500 гр)

Агар для микробиологического контроля следовых количеств антимикробных компонентов HiMedia M1631-500G (уп/500 гр) — сухая питательная среда с конечным pH 6,00. HiMedia M1631-500G применяют для анализа остатков антимикробных компонентов в образцах мяса и органов методом диффузии в агар и методом четырёх чашек ЕЭС с использованием Bacillus subtilis ATCC 6633.

Назначение

Antimicrobial Inhibitor Test Agar pH 6.0 предназначен для анализа остаточных количеств антимикробных компонентов в образцах мяса и органов с использованием Bacillus subtilis ATCC 6633 в качестве тест-организма.

Состав

Формула среды рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Конечный pH: 6,00 при 25 °C.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 25 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 1 мл суспензии спор Bacillus subtilis на каждый литр стерильной охлаждённой среды при температуре 50–56 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Мясные продукты и сырьё из мышечной ткани, помимо промывки, обрабатывают антимикробными соединениями, включая хлор и органические кислоты, для санитарной обработки. Для таких соединений описаны различные концентрации и различная степень эффективности в зависимости от концентрации.

Antimicrobial Inhibitor Test Agar pH 6.0 используют для анализа остаточных антимикробных компонентов в образцах мяса и органов методом диффузии в агар и методом четырёх чашек ЕЭС с применением Bacillus subtilis ATCC 6633 в качестве тест-организма.

Триптон и мясной экстракт служат источниками углерода, азота и факторов роста для микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс питательной среды.

Метод диффузии в агар

1. Небольшие срезы образца мяса поместите на чашки с засеянной тестовой агаризованной средой.
2. Инкубируйте чашки.
3. При наличии в образце антимикробные компоненты диффундируют в питательную среду и подавляют рост тест-организма.
4. В результате вокруг образца формируется зона, свободная от роста.
5. Повторите испытание на всех трёх средах Antimicrobial Inhibitor Test Agar с различными значениями pH:
   • M1631 — pH 6,0;
   • M1601 — pH 7,2;
   • M1632 — pH 8,0.

Различные анализируемые антибиотики, включая пенициллин, стрептомицин и сульфонамиды, имеют разные оптимальные диапазоны pH для проявления активности:

• пенициллин G оптимально активен при pH 6,0;
• стрептомицин оптимально активен при pH 8,0;
• сульфонамиды оптимально активны при pH 7,2.

Метод четырёх чашек ЕЭС

1. Расплавленную и охлаждённую среду Antimicrobial Inhibitor Test Agar засевайте суспензией спор тест-организма Bacillus subtilis.
2. Используйте 1 часть суспензии спор, тщательно перемешайте с питательной средой.
3. Разлейте засеянную среду в чашки Петри.
4. На одну половину засеянной чашки асептически поместите два небольших фрагмента образца мяса или органа размером 2–8 мм на достаточном расстоянии друг от друга.
5. На вторую половину чашки поместите диски со стандартным антибиотиком, подлежащим анализу, в качестве контроля.
6. Используйте диск с 0,01 МЕ натриевой соли пенициллина G в качестве стандартного диска.
7. Инкубируйте чашки в течение 18–24 ч при 30 °C для Bacillus subtilis.
8. После инкубации измерьте зоны ингибирования.
9. Измерьте зону ингибирования между краем среза ткани и границей роста тест-организма.
10. Зону размером не менее 2 мм расценивайте как положительную.
11. Зону размером менее 2 мм (12 мм) расценивайте как сомнительную.
12. Стандартный диск должен формировать зону ингибирования не менее 6 мм.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция среды

Реакция 2,5%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики и зоны ингибирования оценивают после инкубации в течение 18–24 ч при 30 °C с использованием Bacillus subtilis и при 37 °C с использованием M.luteus.

Технические характеристики

• Полное наименование: Antimicrobial Inhibitor Test Agar pH 6.0
• Артикул: M1631-500G
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение: животное
• Назначение изделия: агар
• Конечный pH: 6,00 при 25 °C
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707
• Фасовка: 500 г

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Область применения

Среда используется для:

• анализа остаточных антимикробных компонентов в мясе;
• анализа образцов органов;
• контроля остатков хлора и органических кислот после санитарной обработки мышечной ткани;
• определения активности пенициллина, стрептомицина, сульфонамидов и других антимикробных компонентов;
• проведения испытаний методом диффузии в агар;
• проведения испытаний методом четырёх чашек ЕЭС.

Ключевое техническое отличие M1631 от сред M1601 и M1632 заключается в значении pH: M1631 имеет pH 6,0, M1601 — pH 7,2, M1632 — pH 8,0; выбор среды связан с оптимальной активностью анализируемого антибиотика.