Основа анаэробной тиогликолевой среды HiMedia M1616-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа анаэробной тиогликолевой среды HiMedia M1616-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia предназначена для культивирования анаэробных микроорганизмов. Среда содержит тиогликолят натрия и L-цистеин в качестве восстановителей, поддерживающих низкое содержание кислорода, а фасовка составляет 500 г.

Назначение

Анаэробная тиогликолевая среда применяется для культивирования анаэробных микроорганизмов. Среда также используется для определения устойчивости анаэробов к различным антибиотикам методом серийных разведений.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 40,55 г сухой основы и суспендируйте в 900 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 100 мл стерильной сыворотки.
6. Тщательно перемешайте.
7. В асептических условиях разлейте среду в стерильные пробирки.

Принцип действия и интерпретация

Анаэробная тиогликолевая среда используется для культивирования анаэробов в соответствии с методикой Caselitz и Freitag. Анаэробные микроорганизмы предъявляют особые требования к питательным свойствам субстрата и хорошо растут на этой среде.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• ферментативный гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки, мясной экстракт и гидролизат печени обеспечивают микроорганизмы азотом, углеродом и другими питательными веществами, необходимыми для роста бактерий;
• глюкоза является сбраживаемым углеводом;
• хлорид натрия обеспечивает необходимые ионы и поддерживает осмотический баланс среды;
• тиогликолят натрия и L-цистеин действуют как восстановители и поддерживают низкое содержание кислорода в среде, что позволяет размножаться облигатным анаэробам;
• небольшое количество агара способствует созданию анаэробных условий.

Анаэробные микроорганизмы являются частью нормальной бактериальной микрофлоры человека и животных. Анаэробные виды, включая клостридии, имеют значение как патогенные агенты при инфекционных заболеваниях и как причина микробиологической порчи пищевых продуктов; виды рода Clostridium относятся к основным причинам пищевых отравлений и желудочно-кишечных заболеваний.

Определение минимальной подавляющей концентрации антибиотика

Для определения устойчивости анаэробов к различным антибиотикам:

1. Разлейте по 4,8 мл среды в стерильные пробирки, содержащие по 0,1 мл антибиотика в последовательных разведениях.
2. Инокулируйте пробирки 0,1 мл стандартизованной суспензии чистой культуры исследуемых бактерий.
3. После инкубации определите наличие видимого роста.
4. Минимальной подавляющей концентрацией (МПК) антибиотика считают наименьшую концентрацию, при которой видимый рост отсутствует.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: полутвёрдая среда, сопоставимая с гелем, содержащим 0,07 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель от янтарного до тёмно-янтарного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,05 % масс./об. при 25 °C; pH 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены после добавления стерильной сыворотки и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.