Основа среды Киршнера модифицированная HiMedia M161-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа среды Киршнера модифицированная HiMedia M161-500G (уп/500 гр)» — порошкообразная основа для приготовления жидкой среды с конечным pH 7,4 ± 0,2. Применяется для культивирования Mycobacterium tuberculosis из клинических образцов, преимущественно мокроты, с добавлением лошадиной сыворотки и пенициллина.

Назначение

Основа среды Киршнера модифицированная HiMedia M161-500G предназначена для приготовления питательной среды для культивирования Mycobacterium tuberculosis из клинических образцов.

• Форма выпуска: порошок
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Фасовка: 500 г
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03706
• Тип применения: для профессионального использования и in vitro диагностики

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Mycobacterium tuberculosis — кислотоустойчивая грамположительная аэробная бактерия, являющаяся возбудителем большинства случаев туберкулёза. Единственным резервуаром бактерии служит человек. Многие непатогенные микобактерии входят в состав нормальной микрофлоры человека и чаще всего обнаруживаются в сухих и маслянистых местах.

Среда Киршнера первоначально разработана Киршнером на основе состава среды Лонга и позднее модифицирована добавлением глицерина и обогащающих компонентов для культивирования M. tuberculosis. Среда применяется для проведения тестов с антибактериальными и противотуберкулёзными препаратами, а также иногда для дифференциального культивирования M. tuberculosis из патологического материала.

Киршнера агаровая среда получают добавлением 2 % агара. Киршнера полужидкую агаровую среду получают добавлением агара в количестве до 0,1 %.

При скрининговом тестировании противотуберкулёзных препаратов на плотных средах для получения культуры туберкулёзных бактерий требуется не менее 3–4 недель. На жидкой среде результаты могут быть получены через одну–две недели, поэтому жидкую среду широко используют, когда необходимы ускоренные результаты.

Среда Киршнера содержит два фосфата, сульфат и цитрат, которые обеспечивают буферные свойства среды. Благодаря этому среду можно инокулировать непосредственно, без предварительной нейтрализации. L-аспарагин поддерживает рост M. tuberculosis, являясь подходящим питательным веществом для данного микроорганизма. Лошадиная сыворотка также способствует росту микроорганизма. Пенициллин подавляет рост загрязняющих бактерий.

На начальном этапе после инокуляции M. tuberculosis на дне пробирки наблюдаются зернистые колонии. По мере инкубации на поверхности образуется бактериальная плёнка, в результате чего среда становится прозрачной.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 15,1 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 200 мл глицерина.
3. Нагрейте смесь до кипения для полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду порциями по 9 мл.
5. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 15 мин. Указанный режим соответствует давлению около 0,069 МПа (10 фунтов давления).
6. Непосредственно перед использованием в асептических условиях добавьте к каждой порции 9 мл среды 1 мл лошадиной сыворотки RM1239 и 100 МЕ пенициллина.

Тип образца

• Клинический образец: мокрота.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 1,51 % мас./об. с глицерином
• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: бесцветный раствор с небольшим количеством белого осадка на дне
• Добавки перед использованием: лошадиная сыворотка RM1239 и 100 МЕ пенициллина
• Рекомендуемая температура инкубации для оценки культуральных свойств: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации для оценки культуральных свойств: 2–4 недели

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель в среде с добавлением лошадиной сыворотки RM1239 и 100 МЕ пенициллина.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде различающиеся характеристики роста.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить препарат в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• После использования: плотно закрывать контейнер.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Неправильное хранение может привести к образованию комков. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для in vitro диагностики.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• Основа среды Киршнера модифицированная HiMedia M161-500G, 500 г.

Дополнительные компоненты

Для приготовления