Дифференциальный усиленный агар для выделения клостридий HiMedia M1603-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Дифференциальный усиленный агар для выделения клостридий HiMedia M1603-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для количественного определения и культивирования клостридий из проб воды и клинического материала. Среда дифференцирует сульфитредуцирующие клостридии по почернению колоний и применяется при анаэробной инкубации.

Назначение

Дифференциальный усиленный агар предназначен для количественного определения и культивирования клостридий из проб воды и клинического материала.

Среда применяется:

• совместно с мембранной фильтрацией для подсчёта Clostridium thermosaccharolyticum в сахаре;
• для исследования кишечной микрофлоры с добавлением крови;
• для общего подсчёта микроорганизмов и подсчёта лактобацилл в фекалиях человека и животных;
• для определения бактероидов.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Пептон HM B# эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B служат источниками азота, необходимых питательных веществ и факторов роста для микроорганизмов. Глюкоза является источником углерода и энергии.

Бисульфит натрия и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему восстановления сульфита, при котором формируются колонии чёрного цвета. Резазурин является окислительно-восстановительным индикатором и используется для выявления анаэробных условий в среде.

Почернение среды служит предположительным признаком присутствия сульфитредуцирующих клостридий. Почернение пробирок после термического шока подтверждает наличие клостридий в исследуемом материале.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика подготовки и анализа образцов

1. Измельчите исследуемый материал в гомогенизаторе и приготовьте последовательные десятикратные разведения в растворе Рингера ¼ концентрации (M525) или в 0,1%-ной пептонной воде (M028).
2. Перенесите 1 мл или 0,1 мл подходящего разведения — в зависимости от количества исходной пробы — на дно пробирок с расплавленным дифференциальным усиленным агаром для выделения клостридий, охлаждённым до 45–50 °C.
3. Приготовьте две пробирки для каждого разведения по одной и той же процедуре.
4. Плотно закройте пробирки крышками.
5. Одну из двух пробирок с разведением прогрейте до 80 ± 1 °C в течение 10 мин для уничтожения вегетативных клеток.
6. Инкубируйте пробирки после термического шока и пробирки без термического шока при 35 ± 1 °C в течение 5 суток.
7. Оцените почернение пробирок как признак восстановления сульфита.
8. Пробирки без термического шока, в которых наблюдается почернение, пересейте на дифференциальный усиленный агар для выделения клостридий для подтверждения результата.
9. Пробы также можно наносить на поверхность агаризованной среды методом посева штрихом, поверхностного посева или заливочного посева.
10. Глубокий слой агаризованной среды можно инокулировать уколом.
11. При использовании метода фильтрации дифференциальный усиленный агар для выделения клостридий можно наносить поверх мембранного фильтра.
12. Чашки и пробирки инкубируйте при 35 ± 2 °C в течение 24–48 ч в анаэробных условиях.

Типы образцов

• Пробы воды.
• Клинический материал: фекалии.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для клинического материала выполняйте сбор и обработку образцов согласно действующим руководствам и локальным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизмов требуются дополнительные биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель светло-розового цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 4,25 % мас./об. при 25 °C; pH 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики определяют в анаэробной атмосфере после инкубации при 30–35 °C в течение 1 недели.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения закрытого контейнера: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде в плотно закрытом контейнере.
• Плотно закрывайте флакон после каждого использования для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных