Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН ( 7.2) HiMedia M1601-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Агар для изучения следовых количеств антимикробных компонентов, рН (7.2) HiMedia M1601-500G (уп/500 гр) производства HiMedia с фиксированным значением pH 7,2. Применяется для остаточного анализа антимикробных компонентов в образцах мяса и органов с использованием тест-организма Bacillus subtilis (ATCC 6633).

Область применения

Среда рекомендуется для выявления следовых количеств антимикробных соединений (например, сульфонамидов) в образцах мышечной и органной ткани животных. Анализ проводится методом диффузии в агаре или методом четырех чашек (EEC Four-Plate-Test).

Принцип измерения и интерпретация

Для санитарной обработки мясных продуктов используются хлор и органические кислоты, а также антимикробные препараты. Различные антибиотики имеют разный диапазон pH для оптимальной активности: например, пенициллин G активен при pH 6,0, стрептомицин — при pH 8,0, а сульфонамиды — при pH 7,2.

Метод диффузии в агаре

Небольшие срезы образца мяса помещают на посеянные чашки с агаром и инкубируют. Если в образце присутствуют антимикробные компоненты, они диффундируют в среду и подавляют рост тест-организмов, образуя зону торможения роста. Для анализа разных групп антибиотиков используют среды с разным pH: M1631 (pH 6,0), M1601 (pH 7,2) и M1632 (pH 8,0). Для повышения чувствительности среды к остаткам сульфонамидов в состав добавляют триметоприм (50 мкг/л).

Метод четырех чашек (EEC Four-Plate-Test)

1. В расплавленный и охлажденный агар вносят суспензию спор Bacillus subtilis, тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри.
2. В одну половину посеянной чашки асептически помещают небольшой фрагмент (2–8 мм) образца мяса или органа.
3. Во вторую половину чашки помещают контрольные диски со стандартным антибиотиком (для сульфонамидов используется диск 0,5 мкг).
4. Чашки инкубируют 18–24 часа при 30 °C.
5. Измеряют зону торможения между краем ткани и границей роста организма. Зона $\ge$ 2 мм считается положительным результатом, зона < 2 мм — сомнительным. Контрольный диск должен иметь зону торможения не менее 6 мм.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,2.

Методика приготовления и использования

1. Растворить 25,34 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Внести 1 мл суспензии спор Bacillus subtilis на литр стерильной охлажденной среды.
6. Добавить триметоприм в концентрации 50 мкг на литр среды.
7. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,3% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,20 (для 2,53% водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики роста и зоны торможения наблюдались с использованием B. subtilis после инкубации при 30 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.