Основа бульона Болтона HiMedia M1592-500G (уп/500 гр)

Основа бульона Болтона HiMedia M1592-500G (уп/500 гр) — селективная среда для обогащения культур Campylobacter из пищевых продуктов, кормов для животных и термотолерантных видов Campylobacter из воды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям ISO 10272-1:2017, ISO 17995:2019(E) и ISO 11133:2014(E)/Amd.:2020.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения видов Campylobacter (в частности C. jejuni, C. coli и C. lari), которые вызывают диарею различной степени тяжести. Благодаря добавлению коктейля антибиотиков (цефоперазон, ванкомицин, триметоприм и амфотерицин B) среда становится селективной: ванкомицин, цефоперазон и триметоприм подавляют рост грамположительных и грамотрицательных бактерий, а амфотерицин B существенно ограничивает рост дрожжей и плесневых грибов. Пептон, гидролизат лактальбумина и дрожжевой экстракт способствуют реанимации сублетально поврежденных клеток Campylobacter.

Состав

Состав основы M1592 (г/л):

Состав селективной добавки Bolton Selective Supplement (FD231), 2 флакона:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 13,80 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое одного регидратированного флакона селективной добавки Bolton (FD231) и 25 мл стерильной лизированной дефибринированной крови лошади. Лизис крови может быть осуществлен с помощью сапонина или путем замораживания с последующим оттаиванием.
6. Тщательно перемешайте и асептически разлейте в стерильные пробирки или колбы.

Процедура анализа

1. Подготовка первичной суспензии: возьмите 10 г или 10 мл исследуемой пробы и добавьте 90 мл среды бульона Болтона.
2. Селективное обогащение: инкубируйте первичную суспензию в микроаэрофильной атмосфере при 37 °C в течение 5 $\pm$ 1 часа, затем при 41,5 °C в течение 44 $\pm$ 4 часов.
3. Посев: используя полученную культуру, проведите инокуляцию стерильной петлей (10 мкл) на поверхность агара mCCD (M887I).
4. Инкубация: plates инкубируют при 41,5 °C в микроаэрофильной атмосфере в течение 44 $\pm$ 4 часов.
5. Подтверждение: для окончательного подтверждения проводят биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Вид: порошок
• Цвет порошка: от светло-желтого до коричневато-желтого, однородный, свободно текущий
• Цвет и прозрачность готовой среды (база): коричневато-желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий раствор
• Цвет и прозрачность готовой среды (с кровью): красный или коричневый, непрозрачный раствор
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Происхождение компонентов: животное

Культуральные характеристики

Характеристики продуктивности и селективности определены после инкубации при 37 $\pm$ 1 °C в течение 5 $\pm$ 1 часа, затем при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 44 $\pm$ 4 часов в микроаэрофильной атмосфере. Последующий субкультивинг проводился на mCCD-агаре (M887I) при 41,5 °C в микроаэрофильной атмосфере в течение 44 $\pm$ 4 часов.

Область применения

Среда используется для анализа проб пищевых продуктов, кормов для животных и проб воды. Применяется в микробиологических лабораториях для контроля безопасности пищевой продукции и мониторинга окружающей среды в зонах производства.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию каждой партии среды.
• При работе с пробами и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, средства защиты глаз и лица) и соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация отработанных сред должна осуществляться путем автоклавирования или инсинерации в соответствии с протоколами по обращению с инфекционными материалами.