HiMedia M1591-5KG Триптон-желчный глюкуроновый агар

Сухая питательная среда HiMedia M1591-5KG Триптон-желчный глюкуроновый агар для обнаружения и количественного определения Escherichia coli. Применяется для анализа пищевых продуктов, кормов для животных, воды и клинических образцов; состав и характеристики соответствуют стандартам ISO 16649-2:2001 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.:2020.

Принцип измерения

Среда предназначена для идентификации Escherichia coli по наличию фермента глюкуронидазы, который высокоспецифичен для данного вида. В состав среды входит хромогенный агент X-глюкуронид: клетки E. coli поглощают его, и внутриклеточная глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвобожденный хромофор окрашивает колонии E. coli в сине-зелёный цвет.

Триптон обеспечивает организмы углеродом, азотом, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Область применения

Среда используется для выделения и подсчёта Escherichia coli в следующих типах образцов:

• Клинические материалы (например, моча).
• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. {Suspension}: Растворить 39,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. {Dissolution}: Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. {Sterilization}: Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. {Pouring}: Охладить до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Посев и инкубация

1. Поверхность разлитой среды перед использованием необходимо высушить.
2. Образцы пищевых продуктов разводят 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой 0,1 % (масс./об.) (M028) и гомогенизируют в блендере или стомачере.
3. Пипеткой наносят 0,5 мл или 1,0 мл гомогенизированного образца на поверхность среды и распределяют стерильным стеклянным шпателем.
4. Инкубируют чашки при 30 °C в течение 4 часов, затем при 44 °C в течение 18 часов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 44 $\pm$ 1 °C в течение 21 $\pm$ 3 ч. Скорость восстановления считается 100 % при росте бактерий на контрольной среде — соево-казеиновом дигест-агаре (Tryptone Soya Agar).

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды Salmonella могут быть $\beta$-глюкуронидаза-положительными.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в In Vitro диагностике.
• Требуется использование средств индивидуальной защиты: перчаток, защитной одежды, средств защиты глаз и лица.
• Утилизация: загрязнённые материалы и остатки среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.