Основа модифицированного бульона PPLO без кристаллвиолета HiMedia M1586-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа модифицированного бульона PPLO без кристаллвиолета HiMedia M1586-500G (уп/500 гр)» — порошкообразная основа модифицированного бульона PPLO без кристаллвиолета. Основа предназначена для выделения и культивирования Mycoplasma; для полноценного роста требуется добавление конской сыворотки или обогатительной добавки HPYT, а инкубацию проводят в атмосфере с 5–10 % CO₂.

Назначение

Основа модифицированного бульона PPLO без кристаллвиолета предназначена для выделения и культивирования Mycoplasma — микроорганизмов, относимых к группе плевропневмониеподобных организмов. Тип образца: клинические образцы.

Продукт предназначен только для диагностики вне организма (in vitro) и профессионального применения.

Состав

Состав, г/л:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров работы среды.

Принцип и интерпретация

PPLO-агар был описан Morton, Smith и Leberman и использовался при изучении требований Mycoplasma к условиям роста, а также для идентификации и культивирования этих микроорганизмов.

Бульон PPLO без кристаллвиолета готовят по формуле, описанной Morton и Lecce. Кристаллвиолет исключён из состава из-за ингибирующего действия на некоторые виды Mycoplasma. Среда применяется для культивирования Mycoplasma в исследовательских работах.

Для культивирования Mycoplasma компоненты среды и все добавки не должны содержать токсичных веществ даже в малых количествах. Для хорошего роста многим видам Mycoplasma требуется сыворотка; антибиотик необходим для предотвращения роста контаминирующих организмов.

Большинство видов Mycoplasma являются аэробными или факультативно анаэробными, однако некоторые виды относятся к микроаэрофилам. Отдельные анаэробные сапрофитные Mycoplasma лучше растут при 22–35 °C, тогда как патогенные штаммы растут при 35 °C.

Пробирки следует инкубировать в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа (CO₂), и исследовать через 48 ч инкубации. Не следует считать пробирки отрицательными и утилизировать их ранее чем через 3 недели инкубации.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 21,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 300 мл конской сыворотки RM1239 или 10 флаконов обогатительной добавки HPYT FD075.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.

Требования к образцам и обращение

Для работы с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Виды Mycoplasma могут быть аэробными или факультативно анаэробными, а некоторые — микроаэрофильными; для оптимального выделения необходимо обеспечить соответствующие условия инкубации.
2. Отдельные анаэробные сапрофитные Mycoplasma лучше растут при 22–35 °C, тогда как патогенные штаммы растут при 35 °C; температурный режим должен поддерживаться в соответствии с исследуемым микроорганизмом.
3. Среда имеет высокую степень обогащения, поэтому при инокуляции необходимо предотвращать контаминацию.

Контроль качества

Внешний вид и свойства среды

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор жёлтого цвета в пробирках.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,1 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 10 % CO₂ с добавлением конской сыворотки RM1239 или 10 флаконов обогатительной добавки HPYT FD075 после инкубации при 22–35 °C в течение 24–48 ч.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Конечное значение pH: 7,8 ± 0,2.
• Диапазон контроля pH: 7,60–8,00.
• Масса для приготовления: 21,0 г на 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
• Дополнительный объём после приготовления основы: 300 мл конской сыворотки или 10 флаконов обогатительной добавки HPYT.
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа).

Совместимые добавки

• Конская сыворотка RM1239: 300 мл на приготовленную основу.
• Обогатительная добавка HPYT FD075: 10 флаконов на приготовленную основу.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и