Сухая дифференциально-селективная питательная среда HiMedia M1582-500G Агар МакКонки с кристаллическим фиолетовым и без хлорида натрия предназначена для выделения и восстановления представителей семейства Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек. Среда применяется для микробиологического анализа клинических образцов, пищевых продуктов, молочных продуктов и воды, дифференцируя микроорганизмы по способности ферментировать лактозу и предотвращая распространение колоний Proteus.

Назначение

Среда рекомендована как дифференциальная среда для селекции и восстановления представителей семейства Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек.

Области применения:

• микробиологическое исследование клинических образцов;
• исследование фекалий и мочи;
• микробиологический контроль пищевых продуктов и молочных образцов;
• прямой посев проб воды для количественного определения колиформных бактерий.

Среда также применяется в соответствии с методами микробиологического исследования пищевых продуктов, воды, молока и молочных продуктов.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 500 г
• Реакция: водный раствор с массово-объёмной концентрацией 4,65 % при 25 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30

Принцип действия и интерпретация

Среды МакКонки применяются для обогащения и выделения колиформных бактерий. Агар МакКонки относится к селективным и дифференциальным средам для культивирования кишечных микроорганизмов из различных клинических образцов.

В исходную рецептуру МакКонки входили бычья желчь, подавляющая рост грамположительных бактерий, и лакмус, использовавшийся как индикатор образования кислоты при ферментации лактозы. Позднее лакмус заменили индикатором феноловым красным, что упростило и повысило точность интерпретации результатов. Наиболее существенной модификацией исходной рецептуры стала замена бычьей желчи очищенными желчными солями: это повысило селективность среды и устранило присущую желчи мутность, обусловленную жировыми компонентами. Дополнительной модификацией стало включение ингибиторов — кристаллического фиолетового и индикатора pH нейтрального красного.

В исходной среде присутствуют белковые компоненты, желчные соли, хлорид натрия и два красителя. Отсутствие хлорида натрия предотвращает распространение колоний Proteus. Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, ингибирующими большинство видов грамположительных бактерий. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу.

Штаммы, ферментирующие лактозу, образуют красные или розовые колонии; вокруг колоний может формироваться зона осаждения желчи под действием кислоты. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8. Штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 46,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при осторожном перемешивании до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
7. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Образцы

Типы образцов:

• клинические: фекалии, моча;
• пищевые продукты и молочные образцы;
• пробы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среда дифференцирует микроорганизмы на основании ферментации лактозы. Для полной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.
2. При инокуляции поверхность среды должна быть сухой.

Контроль качества

• Внешний вид: от светло-жёлтого до светло-розового, однородный, свободно текучий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета.
• Реакция: pH водного раствора с концентрацией 4,65 % масс./объём при 25 °C — 7,1 ± 0,2.
• pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Упаковка: плотно закрытый контейнер.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Раб