HiMedia M1582-100G Агар МакКонки с кристаллическим фиолетовым и без хлорида натрия

Питательная агаровая среда HiMedia M1582-100G Агар МакКонки с кристаллическим фиолетовым и без хлорида натрия предназначена для селективного и дифференциального выделения представителей семейства Enterobacteriaceae и других кишечных грамотрицательных палочек, хранение — при 10–30 °C. Среда применяется для микробиологического анализа клинических, пищевых, молочных и водных образцов, а дифференциация основана на ферментации лактозы и требует дальнейших биохимических и серологических тестов для полной идентификации.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и восстановления представителей Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек.

HiMedia M1582-100G представляет собой сухую агаровую среду в порошке массой 100 г. Среда предназначена для:

• микробиологического исследования клинических образцов;
• анализа пищевых продуктов и молочных образцов;
• прямого посева водных проб для подсчёта колиформных бактерий;
• дифференциации грамотрицательных бактерий по способности ферментировать лактозу.

Среда также принята в методиках исследования молока и молочных продуктов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Среда МакКонки является обогатительной системой для колиформных бактерий. Агар МакКонки относится к селективным и дифференциальным средам для культивирования кишечных микроорганизмов из различных клинических образцов.

В исходную формулу МакКонки входили бычья желчь, подавляющая рост грамположительных бактерий, и лакмус, служивший индикатором образования кислоты при ферментации лактозы. Позднее лакмус заменили индикатором феноловым красным, что упростило и повысило точность интерпретации результатов. Наиболее значимой модификацией исходной формулы стала замена бычьей желчи очищенными желчными солями. Такая замена повышает селективность среды и предотвращает появление характерной мутности, обусловленной жировыми компонентами желчи. В состав также были введены дополнительные ингибиторы — кристаллический фиолетовый и индикатор pH нейтральный красный.

В исходную среду входят белковые компоненты, желчные соли, хлорид натрия и два красителя. Отсутствие хлорида натрия предотвращает распространение колоний Proteus. Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, ингибирующими большинство видов грамположительных бактерий.

Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу:

• штаммы, ферментирующие лактозу, образуют красные или розовые колонии; вокруг колоний может формироваться зона осаждённой кислотой желчи;
• красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8;
• штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 46,53 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения при осторожном перемешивании круговыми движениями до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
8. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Типы образцов

Допустимые типы образцов:

• клинические образцы: фекалии, моча;
• пищевые продукты;
• молочные образцы;
• водные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда дифференцирует микроорганизмы на основании ферментации лактозы. Для полной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.
2. Поверхность среды должна быть сухой во время инокуляции.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,65 % масса/объём при 25 °C; pH — 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Ожидаемые культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.