HiMedia M158-100G Основа азидного кровяного агара

Основа азидного кровяного агара HiMedia M158-100G предназначена для селективного выделения и культивирования видов Streptococcus и Staphylococcus из смешанной бактериальной флоры. Применяется для анализа клинических (кровь) и неклинических образцов; содержит азид натрия для подавления роста грамотрицательных бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Основа азидного кровяного агара является модификацией бульона Эдвардса, разработанного для выявления стрептококков при мастите крупного рогатого скота. В состав среды введены азид натрия и кристаллический фиолетовый.

Основные компоненты и их функции:

• Специальный пептон и HM Peptone B: источники углерода, азота и незаменимых факторов роста.
• Азид натрия: селективный агент, который подавляет рост грамотрицательных бактерий и препятствует «роению» (swarming) Proteus.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Дефибринированная кровь (добавляется при приготовлении): служит дополнительным источником факторов роста и позволяет визуализировать характер гемолиза.

Эффективность ингибирования азидом натрия зависит от pH среды. При pH 7,2 азид натрия не препятствует гемолитическим реакциям стрептококков, однако характер гемолиза на азидном кровяном агаре может отличаться от картины на неселективном кровяном агаре.

Для достижения наилучших результатов рекомендуется использовать малую посевную дозу и проводить анаэробную инкубацию для усиления гемолитической реакции.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,2 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для получения полноценного кровяного агара асептически добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Сбор и обработка образцов

Для клинических образцов (кровь) следует использовать стандартные методы забора и транспортировки согласно установленным руководствам. После использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2

Общие параметры

• Вес: 100 г
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишнево-красного цвета, который темнеет при хранении.
• Реакция 3,32 % водного раствора (при 25 °C): pH 7,2 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения применения

1. Степень и характер гемолиза зависят от типа используемой крови (например, кровь овцы или лошади) и общего состава агара.
2. Азид натрия влияет на процесс гемолиза, поэтому картина может отличаться от результатов на неселективном кровяном агаре.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• Продукт предназначен только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• При работе использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: обеспечить безопасное уничтожение путем автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы.