HiMedia M158-100G Основа азидного кровяного агара

Основа питательной среды HiMedia M158-100G Основа азидного кровяного агара производства HiMedia для селективного выделения и культивирования видов Streptococcus и Staphylococcus из смешанной бактериальной флоры. Применяется для клинических и неклинических образцов, включая кровь, с добавлением 5 % дефибринированной крови; азид натрия подавляет рост грамотрицательных бактерий и предотвращает роение Proteus.

Назначение

Азидная кровяная агаровая основа предназначена для селективного выделения и культивирования видов Streptococcus и Staphylococcus из смешанной бактериальной флоры в клинических и неклинических образцах.

Продукт представляет собой основу питательной среды массой 100 г. Среда является модификацией бульона, первоначально разработанного Edwards для выявления стрептококков при мастите крупного рогатого скота. Позднее Packer модифицировал исходный бульон в кровяной агар с добавлением азида натрия и кристаллического фиолетового.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. HM Peptone B эквивалентен экстракту говядины.

• Конечный pH: 7,2 ± 0,2 при 25 °C

Принцип действия и интерпретация

Специальный пептон и HM Peptone B служат источниками углерода, азота и необходимых факторов роста.

Азид натрия действует как селективный агент, подавляя рост грамотрицательных бактерий. Азид натрия также предотвращает роение Proteus. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс питательной среды.

Для приготовления кровяного агара в среду асептически добавляют стерильную дефибринированную кровь. Кровь служит дополнительным источником факторов роста и позволяет визуализировать характер гемолиза.

pH среды влияет на ингибирующее действие азида натрия. При pH 7,2 азид натрия не препятствует гемолитическим реакциям стрептококков, однако характер гемолиза стрептококков на азидном кровяном агаре отличается от характера гемолиза на неселективном кровяном агаре.

Для получения оптимальных результатов используют небольшой посевной материал и проводят анаэробную инкубацию, способствующую проявлению гемолитической реакции. На чашках с кровяным агаром можно визуализировать различные типы гемолиза.

Тип образца

• Клинические образцы: кровь.

Методика приготовления среды

1. Ресуспендируйте 33,2 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для приготовления чашек с кровяным агаром асептически добавьте стерильную дефибринированную кровь в концентрации 5 % об./об.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды, базовая среда: гель жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды после добавления 5 % дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета, темнеющий при выдерживании.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,32 % м/об при 25 °C.
• pH по реакции: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5 % стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Степень гемолиза и наблюдаемый характер гемолиза зависят от типа крови, использованной для приготовления кровяного агара, а также от состава кровяного агара.
2. Азид натрия влияет на гемолиз, поэтому характер гемолиза может отличаться от наблюдаемого на неселективном кровяном агаре.
3. Характер гемолиза зависит от вида используемой крови, например овечьей или лошадиной.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• При работе соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Условия эксплуатации, хранения и срок годности

• Температура хранения продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный технический контекст

В отличие от неселективного кровяного агара, азидная основа содержит азид натрия, который подавляет рост грамотрицательных бактерий, предотвращает роение Proteus и может изменять характер гемолиза стрептококков.

Производитель

HiMedia Laboratories Limited, Индия.