Основа забуференного обогатительного бульона для листерий HiMedia M1578-500G (уп/500 гр)

Компонент питательной среды «Основа забуференного обогатительного бульона для листерий HiMedia M1578-500G (уп/500 гр)» — порошковая основа с конечным pH 7,3 ± 0,2. Предназначен для первичного обогащения и выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов; после добавления селективной добавки среду инкубируют при 30 °C до 48 ч.

Назначение

Забуференная основа обогатительного бульона для листерий рекомендуется Комитетом FDA для обогащения при выделении Listeria monocytogenes. Среда также рекомендована APHA для селективного обогащения L. monocytogenes.

Изделие поставляется в виде основы; селективные свойства готовой среды обеспечиваются после асептического добавления регидратированного содержимого одного флакона селективной добавки для листерий II (FD063I).

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 23,97 г порошковой основы в 500 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки для листерий II (FD063I).
6. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — единственный вид рода Listeria, вызывающий листериоз у человека; однако L. seeligeri, L. welshimeri и L. ivanovii также в отдельных случаях связывают с заболеваниями человека.

Микробиологические и эпидемиологические данные по спорадическим и эпидемическим случаям листериоза показывают, что основным путём передачи инфекции является употребление пищевых продуктов, загрязнённых L. monocytogenes.

L. monocytogenes является известным возбудителем пищевых инфекций из-за высокой заболеваемости среди животных и людей при инфицировании, а также психротрофной природы, обеспечивающей высокую устойчивость к нагреванию, охлаждению и высушиванию. Микроорганизм выделяли на промышленных молочных и других пищевых предприятиях. В природе L. monocytogenes встречается повсеместно: в различных необработанных пищевых продуктах, почве, сточных водах, силосе и речной воде.

Виды Listeria растут в диапазоне pH 4,4–9,6 и способны сохраняться в пищевых продуктах со значениями pH за пределами этого диапазона. Виды Listeria являются микроаэрофильными, грамположительными, неспорообразующими, неинкапсулированными, неветвящимися, правильными короткими подвижными палочками. Наиболее выраженная подвижность наблюдается при 20 °C.

Пищевые образцы часто загрязнены микроорганизмами, не относящимися к роду Listeria, что затрудняет выделение листерий. Для выделения малых количеств L. monocytogenes из пищевых образцов требуется предварительное обогащение. Обогатительный бульон для листерий был модифицирован за счёт повышения буферной ёмкости, что позволяет использовать среду совместно с ДНК-зондами и другими методами, более чувствительными по сравнению с обычным культуральным исследованием.

Функции компонентов

• Ферментативный гидролизат казеина и папаиновый перевар соевой муки обеспечивают аминокислотами и другими сложными азотистыми веществами.
• Декстроза является источником энергии.
• Пируват натрия способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов.
• Фосфаты обеспечивают буферную ёмкость среды.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Дрожжевой экстракт обеспечивает витаминами группы B.
• Селективность среды обеспечивается включением антимикробных агентов.
• Циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов.
• Налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов.
• Акрифлавин подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Методика выделения Listeria monocytogenes из молочных продуктов

Согласно процедуре обогащения FDA для выделения L. monocytogenes из молочных продуктов:

1. Внесите исследуемый образец в обогатительный бульон и инкубируйте при 30 °C в течение 4 ч без селективной добавки.
2. Через 4 ч добавьте селективную добавку.
3. Продолжайте инкубацию ещё 44 ч при 30 °C.
4. Через 24 и 48 ч выполняйте высев обогащённой культуры штриховым методом на одну из следующих сред:
   • основу среды Oxford для листерий (M1145);
   • агар LPM (M1228);
   • основу агара для идентификации листерий PALCAM (M1064).
5. Инкубируйте чашки при 35 °C в течение 24–48 ч.
6. Отберите предположительно листериозные колонии.
7. Дополнительно очистите колонии на триптон-соево-дрожжевом агаре (M1214).
8. Подвергните очищенные изоляты комплексу биохимических тестов для подтверждения присутствия L. monocytogenes.

Контроль качества

Внешний вид и свойства приготовленной среды

• Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с небольшим количеством осадка.
• Реакция: 4,8 % масс./об. водный раствор при 25 °C.
• pH 4,8 % масс./об. водного раствора при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки для листерий (FD063I) и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения