HiMedia M1578-100G Основа буферного бульона для обогащения листерий

Питательная среда HiMedia M1578-100G Основа буферного бульона для обогащения листерий — порошковая основа для приготовления селективного бульона с конечным pH 7,3 ± 0,2. Применяется для обогащения при выделении Listeria monocytogenes из пищевых и молочных продуктов; масса упаковки составляет 100 г, хранение — при температуре ниже 30 °C.

Назначение

Основа буферного бульона для обогащения листерий предназначена для предварительного обогащения при выделении Listeria monocytogenes. Продукт рекомендован Комитетом FDA для обогащения при выделении Listeria monocytogenes и APHA — для селективного обогащения L. monocytogenes.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Температура хранения: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Приготовление среды

1. Суспендируйте 23,97 г основы в 500 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки для листерий II (FD063I).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — единственный вид рода Listeria, вызывающий листериоз у человека; однако в отдельных случаях с заболеваниями человека связывают также L. seeligeri, L. welshimeri и L. ivanovii. Микробиологические и эпидемиологические данные, полученные при спорадических и эпидемических случаях листериоза, показывают, что основным путём передачи является употребление пищевых продуктов, контаминированных L. monocytogenes.

L. monocytogenes является известным возбудителем пищевых инфекций из-за высокой заболеваемости у животных и человека при инфицировании, а также психротрофных свойств, обеспечивающих высокую устойчивость к нагреванию, охлаждению и высушиванию. Микроорганизм выделяли на коммерческих молочных и других пищевых производствах. L. monocytogenes широко распространён в природе и обнаруживается в необработанных пищевых продуктах, почве, сточных водах, силосе и речной воде.

Виды Listeria растут в диапазоне pH 4,4–9,6 и сохраняются в пищевых продуктах с уровнем pH за пределами этого диапазона. Виды Listeria являются микроаэрофильными, грамположительными, неспорообразующими, неинкапсулированными, неподвижно- или подвижнопалочковидными микроорганизмами с короткими, ровными, неветвящимися клетками. Наиболее выраженная подвижность наблюдается при 20 °C.

Образцы пищевых продуктов часто содержат микроорганизмы, не относящиеся к Listeria, что затрудняет выделение листерий. Для выделения небольшого количества L. monocytogenes из пищевых образцов требуется первоначальное обогащение. Бульон для обогащения листерий был модифицирован за счёт повышения буферной ёмкости, что позволяет использовать среду совместно с ДНК-зондами и другими методами, более чувствительными по сравнению с традиционным культуральным исследованием.

Функции компонентов

• Ферментативный гидролизат казеина и папаиновый перевар соевой муки обеспечивают аминокислотами и другими сложными азотистыми соединениями.
• Декстроза является источником энергии.
• Пируват натрия способствует восстановлению повреждённых или ослабленных микроорганизмов.
• Фосфаты обеспечивают буферную ёмкость среды.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Дрожжевой экстракт является источником витаминов группы B.
• Селективность среды обеспечивается введением антимикробных компонентов.
• Циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов.
• Налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов.
• Акрифлавин подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Методика обогащения и выделения L. monocytogenes

Согласно процедуре FDA для выделения L. monocytogenes из молочных продуктов:

1. Внесите исследуемый образец в бульон для обогащения.
2. Инкубируйте при 30 °C в течение 4 ч без селективной добавки.
3. Через 4 ч добавьте селективную добавку.
4. Продолжайте инкубацию ещё 44 ч при 30 °C.
5. Через 24 и 48 ч выполните высев обогащённой культуры штриховым методом на одну из следующих сред:
   • основу среды Oxford для листерий (M1145);
   • агар LPM (M1228);
   • основу агара для идентификации листерий PALCAM (M1064).
6. Инкубируйте посевы при 35 °C в течение 24–48 ч.
7. Отберите предположительно положительные колонии Listeria.
8. Дополнительно очистите колонии на агаре с триптоном, соей и дрожжевым экстрактом (M1214).
9. Очищенные изоляты подвергните комплексу биохимических тестов для подтверждения наличия L. monocytogenes.

Буферная модификация среды позволяет применять её совместно с ДНК-зондами и другими чувствительными методами анализа, дополняющими традиционное культуральное исследование.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор с небольшим количеством осадка.

Реакция и pH

Реакция 4,8 % (м/о) водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки для листерий II (FD063I) и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.