HiMedia M1575A-500G Основа селективного HiCrome агара для E. coli O157:H7

Сухая основа селективного агара HiMedia M1575A-500G Основа селективного HiCrome агара для E. coli O157:H7 производства HiMedia с конечным pH 6,8 ± 0,2. Применяется для селективного выделения и предварительного выявления Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов; для подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Основа предназначена для приготовления селективной питательной среды для выделения и облегчённого выявления Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 31,85 г основы и суспендируйте в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, приблизительно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки NP Selective Supplement (FD187).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагические штаммы E. coli также называют веротоксин-продуцирующими E. coli (VTEC/EHEC). Хотя веротоксин способны продуцировать многие серотипы Escherichia coli, серотипы Escherichia coli O157:H7 и O157:H являются наиболее распространёнными типами, вызывающими инфекции у человека.

Штаммы O157 VTEC обладают несколькими необычными биохимическими признаками, используемыми при лабораторной идентификации. Они относятся к меньшинству штаммов E. coli, отрицательных по β-глюкуронидазе, и не ферментируют сорбитол или рамнозу в течение 24 ч. Такие микроорганизмы можно выделять из фекальных образцов посевом на среды, содержащие D-сорбитол вместо лактозы.

Среда HiCrome® EC O157:H7 Agar основана на составе, описанном Rappaport и Henigh. Среда содержит сорбитол в качестве ферментируемого углевода, а также хромогенную смесь вместо лактозы и индикаторных красителей. Хромогенный субстрат специфически и селективно расщепляется Escherichia coli O157:H7 с образованием окрашенного соединения от тёмно-фиолетового до пурпурно-малинового цвета. Колонии E. coli имеют голубовато-зелёную окраску.

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и питательными веществами, необходимыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление селективной добавки NP Selective Supplement (FD187) придаёт среде селективные свойства.

Теллурит калия селективно подавляет виды Aeromonas и Providencia. Новобиоцин подавляет грамположительные бактерии. Лаурилсульфат натрия способствует подавлению сопутствующей грамположительной микрофлоры.

Образцы

Тип образца: пищевые продукты и пищевое сырьё.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методиками.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую интенсивность роста на данной среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,18 % при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после добавления селективной добавки NP Selective Supplement (FD187) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующий номер WDCM.
** Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 15–25 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты