HiMedia M1575A-100G Основа селективного HiCrome агара для E. coli O157:H7

Основа селективного HiCrome агара для E. coli O157:H7 HiMedia M1575A-100G предназначена для селективного выделения и экспресс-детекции штаммов Escherichia coli O157:H7 из проб пищевых продуктов. Среда основана на модификации состава Раппапорта-Хенига и позволяет дифференцировать целевые микроорганизмы по цвету колоний.

Принцип измерения

Среда HiCrome® EC O157:H7 Agar разработана для выявления энтерогеморрагических штаммов E. coli (VTEC/EHEC), в частности серотипов O157:H7 и O157:H, которые являются частыми возбудителями инфекций у человека. В отличие от большинства штаммов E. coli, данные серотипы не ферментируют сорбитол или рамнозу в течение 24 часов и являются $\beta$-глюкуронидаза-отрицательными.

В составе среды в качестве ферментируемого углевода используется D-сорбитол. Вместо лактозы и индикаторных красителей применена хромогенная смесь. Хромогенный субстрат специфически и селективно расщепляется Escherichia coli O157:H7, в результате чего колонии приобретают темно-фиолетовый или пурпурный цвет. Другие штаммы E. coli образуют колонии сине-зеленого цвета.

Роль компонентов:

• Триптон и экстракт дрожжей: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
• Селективная добавка NP (FD187): обеспечивает селективность среды.
• Теллурит калия: селективно ингибирует виды Aeromonas и Providencia.
• Новобиоцин: подавляет рост грамположительных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия (SLS): способствует подавлению сопутствующей грамположительной микрофлоры.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения с перемешиванием до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона регидратированной селективной добавки NP (FD187).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

1. Посейте пробу пищевого продукта на подготовленную среду.
2. Инкубируйте чашки при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.
3. Проведите визуальную оценку цвета колоний.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечное значение pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

• Вес: 100 г.
• Назначение: Основа среды.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 3,18% (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 6,8 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки NP (FD187) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующий номер WDCM. Bacillus spizizenii ранее именовался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов. Сбор и обработка образцов должны осуществляться в соответствии с действующими руководствами по микробиологическому анализу продуктов питания.

Ограничения:

• Индивидуальные микроорганизмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Каждая партия среды тестируется на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Безопасность и утилизация

При работе со средой и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Утилизация: Загрязненные материалы и использованные препараты продукта подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в инсинераторе в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.