HiMedia M1575A-100G Основа селективного HiCrome агара для E. coli O157:H7

Сухая основа селективного агара HiMedia M1575A-100G Основа селективного HiCrome агара для E. coli O157:H7 производства HiMedia предназначена для селективного выделения и визуального обнаружения Escherichia coli O157:H7. Питательная среда применяется для анализа пищевых образцов, при этом идентификацию выделенных микроорганизмов необходимо подтверждать дополнительными биохимическими и серологическими тестами.

Назначение

Рекомендуется для селективного выделения и облегчённого обнаружения Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 100 г
• Условия хранения: 15–25 °C
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Происхождение: животное

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагические штаммы E. coli также называют веротоксин-продуцирующими E. coli (VTEC/EHEC). Известно множество серотипов Escherichia coli, способных продуцировать веротоксин, однако Escherichia coli O157:H7 и O157:H относятся к наиболее распространённым типам, вызывающим инфекции у человека.

Штаммы O157 VTEC обладают рядом специфических биохимических характеристик, используемых для лабораторной идентификации. Они относятся к меньшинству штаммов E. coli, отрицательных по β-глюкуронидазе, и не ферментируют сорбитол или рамнозу в течение 24 ч. Такие микроорганизмы можно выделять из фекальных образцов посевом на среды, содержащие D-сорбитол вместо лактозы.

Агар HiCrome® EC O157:H7 основан на составе, описанном Rappaport и Henigh. Среда содержит сорбитол в качестве ферментируемого углевода, а хромогенную смесь — вместо лактозы и индикаторных красителей соответственно. Хромогенный субстрат специфично и селективно расщепляется Escherichia coli O157:H7 с образованием окрашенного соединения от тёмно-фиолетового до пурпурно-малинового цвета. E. coli образует колонии голубовато-зелёного цвета.

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают углеродистые и азотистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины и питательные вещества, необходимые для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление селективной добавки NP (FD187) придаёт среде селективные свойства. Теллурит калия селективно подавляет виды Aeromonas и Providencia. Новобиоцин подавляет грамположительные бактерии. Лаурилсульфат натрия способствует подавлению сопутствующей грамположительной микрофлоры.

По сравнению со средами, в которых используется лактоза и индикаторные красители, состав HiCrome EC O157:H7 содержит сорбитол и хромогенную смесь для дифференциации целевых колоний по окраске.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 31,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки NP (FD187).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы и обращение с ними

• Тип образца: пищевые продукты.
• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно действующим установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,18 % при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; в среду добавляют селективную добавку NP (FD187).

• Соответствующий номер WDCM.
• Bacillus spizizenii ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Ограничения применения

1. Микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковый характер роста на среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Пользователю рекомендуется валидировать среду для каждого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, с учётом индивидуальных требований.
3. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Храните порошок при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскры