ХайХром лаурил-сульфатный агар для мембранной технологии HiMedia M1569-500G (уп/500 гр)

Хромогенная питательная среда ХайХром лаурил-сульфатный агар для мембранной технологии HiMedia M1569-500G (уп/500 гр) предназначена для дифференциации и подсчёта Escherichia coli и других колиформ методом мембранной фильтрации. Среда применяется для микробиологического анализа проб воды; сухой порошок хранят при 15–25 °C, а приготовленную среду — при 2–8 °C.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для дифференциации и количественного определения Escherichia coli и других колиформ методом одноступенчатой мембранной фильтрации.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Тип образца: пробы воды
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 500 г
• Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705

Среда также может применяться для выделения E. coli из проб воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 8,8 % масс./об.

Принцип действия

ХайХром лаурил-сульфатный агар представляет собой модификацию лauryl tryptose broth — лаурил-триптозного бульона, разработанного Mallman и Darby.

Хромогенная среда предназначена для предположительной идентификации и дифференциации Escherichia coli и других колиформ при использовании одноступенчатой мембранной фильтрации.

Дифференциация основана на цвете колоний и включает два механизма:

• хромоген X-глюкуронид используется для выявления активности фермента β-D-глюкуронидазы;
• феноловый красный выявляет ферментацию лактозы.

Фермент β-D-глюкуронидаза, продуцируемый E.coli, расщепляет X-глюкуронид, в результате чего колонии приобретают зелёную окраску. Ферментация лактозы определяется по реакции индикатора фенолового красного.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азотистых соединений, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Лактоза служит источником сбраживаемого сахара. Лаурилсульфат натрия подавляет рост микроорганизмов, не относящихся к колиформам.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 87,9 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E.coli, однако отдельные штаммы E.coli могут не обладать активностью этого фермента.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост вследствие различий в пищевых потребностях.
3. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Желирование

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция: реакция 8,8 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ключ: * — соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии. Мера необходима для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Отличие методики

В отличие от классических неселективных сред для колиформ, HiCrome M-Lauryl Sulphate Agar объединяет селективное подавление посторонней микрофлоры лаурилсульфатом натрия и цветовую дифференциацию по активности β-D-глю