Основа диагностического агара для листерий (среда Оттовани модифицированная) HiMedia M1552-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Основа диагностического агара для листерий (среда Оттовани модифицированная) HiMedia M1552-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из клинического материала и пищевых продуктов.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию состава Оттовани и Агости. Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают необходимые питательные вещества для роста Listeria. $\alpha$-метил-D-маннозид выступает в роли ферментируемого углевода. Хлорид лития и добавляемые селективные добавки (FD212 и FD213) подавляют сопутствующую микрофлору, повышая селективность среды. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а гидрофосфат натрия служит буфером.

Дифференциация L. monocytogenes от других видов листерий основана на двух факторах:

1. Активность фосфатидилинозит-специфичной фосфолипазы C (PIPLC): фермент, специфичный для L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат (добавка FD227), что приводит к образованию матового (опалесцирующего) ореола вокруг колоний.
2. Ферментация $\alpha$-метил-D-маннозида: L. monocytogenes ферментирует данный углевод, образуя жёлтые колонии с ореолом. L. ivanovii не ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид, образуя лиловые колонии с ореолом.

Другие виды Listeria не обладают активностью PIPLC и образуют либо жёлтые, либо лиловые колонии без ореола.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. {Suspend} Растворить 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки OA (FD212A) и стерильное содержимое одного флакона обогатительной добавки LM Enrichment Supplement II (FD227).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Интерпретация результатов

• Listeria monocytogenes: жёлтые колонии с матовым ореолом.
• Listeria ivanovii: светло-лиловые колонии с матовым ореолом.
• Другие виды Listeria: жёлтые или лиловые колонии без ореола.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: гомогенный сыпучий порошок от бежевого до лилового цвета
• Плотность готового геля: соответствует 1,2 % агаровому гелю
• Цвет и прозрачность готовой среды: лиловый, опалесцирующий гель

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены с использованием добавок OA Selective Supplement (FD212A) и LM Enrichment Supplement II (FD227) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Среда применяется для анализа клинических образцов и пищевых продуктов. Ограничение: другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC, поэтому их колонии (жёлтые или лиловые) всегда образуются без ореола.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре от +2 до +8 °C.
• Требования к безопасности: только для профессионального использования in vitro. При работе с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности, использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: загрязнённые материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию.

Совместимость и рекомендуемые добавки

Для обеспечения селективности и дифференциации рекомендуются следующие добавки:

• Обогатительная добавка LM Enrichment Supplement II (FD227)
• Селективные добавки OA Selective Supplement (FD212/FD213)