Основа диагностического агара для листерий (среда Оттовани модифицированная) HiMedia M1552-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда «Основа диагностического агара для листерий (среда Оттовани модифицированная) HiMedia M1552-500G (уп/500 гр)» представляет собой порошковую основу для приготовления агара Оттавиани—Агости. Применяется для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из клинического материала и пищевых продуктов с дифференциацией по активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида.

Назначение и область применения

Основа предназначена для приготовления селективной и дифференциальной питательной среды для выделения Listeria monocytogenes из клинических образцов и пищевых продуктов.

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: основа
• Форма выпуска: порошок, 500 г
• Методическая основа: модификация рецептуры Оттавиани и Агости
• Рекомендуемые добавки: обогатительная добавка LM Enrichment Supplement II (FD227), селективная добавка OA Selective Supplement (FD212A), а также селективная добавка FD213
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста Listeria.

α-Метил-D-маннозид является сбраживаемым углеводом. Хлорид лития и внесённые селективные добавки FD212 и FD213 подавляют сопутствующую микрофлору и повышают селективность среды в отношении видов Listeria. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а гидрофосфат натрия двузамещённый выполняет буферную функцию.

Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на выявлении активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида. Фосфолипаза C является важным фактором вирулентности и характерна только для L. monocytogenes и L. ivanovii. Фермент фосфолипаза C, продуцируемый L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат FD227, внесённый в среду, что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний.

Дифференциацию L. monocytogenes и L. ivanovii проводят по утилизации α-метил-D-маннозида и активности PIPLC:

• L. monocytogenes ферментирует α-метил-D-маннозид, образуя жёлтые колонии с ореолом.
• L. ivanovii не ферментирует α-метил-D-маннозид и образует светло-лиловые колонии с ореолом.
• Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и образуют лиловые или жёлтые колонии без ореола.

Listeria monocytogenes — грамположительный патоген человека, передающийся с пищей и вызывающий тяжёлые инфекции у беременных женщин, которые могут приводить к аборту, мертворождению, рождению ребёнка с неонатальным листериозом и менингиту, а также к первичной бактериемии у взрослых и подростков. Патогенность Listeria ivanovii для человека остаётся неопределённой. L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами и не могут быть дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки OA Selective Supplement (FD212A).
6. Добавьте стерильное содержимое одного флакона обогатительной добавки LM Enrichment Supplement II (FD227).
7. Тщательно перемешайте среду.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы.
• Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид и физические свойства

• Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от бежевого до лилового цвета.
• Состояние готовой среды: лиловый опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Гелеобразование: плотное, сопоставимое с 1,2% агаровым гелем.
• Реакция: реакция 7,7% водного раствора при 25 °C.
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч на среде с добавленными селективной добавкой OA Selective Supplement (FD212A) и обогатительной добавкой LM Enrichment Supplement II (FD227).

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и поэтому образуют лиловые или жёлтые колонии без ореола.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования флакон необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или с