HiMedia M1552-1KT Основа агара для подтверждения L. monocytogenes

Основа селективного дифференциального агара HiMedia M1552-1KT для подтверждения Listeria monocytogenes. Применяется для выделения L. monocytogenes из клинических образцов и проб пищевых продуктов; позволяет дифференцировать патогенные виды листерий на основе активности фосфолипазы C.

Область применения

Среда рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из клинических материалов и образцов пищевых продуктов.

Принцип измерения и интерпретация

Основа агара L. mono Confirmatory Agar Base представляет собой модификацию состава по Оттовиани и Агости.

Принцип работы

• Питательные вещества: Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают необходимые нутриенты для роста Listeria.
• Дифференциация: $\alpha$-метил-D-маннозид является ферментируемым углеводом. Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на ферментации $\alpha$-метил-D-маннозида и активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC).
• Селективность: Хлорид лития и добавляемые селективные добавки подавляют сопутствующую микрофлору. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а гидрофосфат натрия выступает в роли буфера.
• Механизм выявления: Фермент фосфолипаза C, специфичный для L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат (добавка FD227), что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний.

Интерпретация результатов

• Listeria monocytogenes: ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид $\rightarrow$ желтые колонии с непрозрачным ореолом.
• Listeria ivanovii: не ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид $\rightarrow$ пурпурные колонии с непрозрачным ореолом.
• Другие виды Listeria: не обладают активностью PIPLC $\rightarrow$ желтые или пурпурные колонии без ореола.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте одну виалу стерильной регидратированной селективной добавки OA (FD212A) и одну виалу стерильной добавки LM Enrichment Supplement II (FD227).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от бежевого до пурпурного цвета
• Свойства геля: плотный, сопоставим с 1,2% агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный опалесцирующий гель
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании добавок OA Selective Supplement (FD212A) и LM Enrichment Supplement II (FD227) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Предназначено для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе с образцами использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.