HiMedia M1552-1KT Основа агара для подтверждения L. monocytogenes
Питательная среда HiMedia M1552-1KT «Основа агара для подтверждения Listeria monocytogenes» — порошковая основа селективной и дифференциальной среды для выделения Listeria monocytogenes, предназначенная для хранения при 10–30 °C. Применяется в микробиологических лабораториях для анализа клинических и пищевых образцов; использование — только для профессиональной работы и диагностики in vitro.
Описание
Питательная среда HiMedia M1552-1KT «Основа агара для подтверждения Listeria monocytogenes» — порошковая основа селективной и дифференциальной среды для выделения Listeria monocytogenes, предназначенная для хранения при 10–30 °C. Применяется в микробиологических лабораториях для анализа клинических и пищевых образцов; использование — только для профессиональной работы и диагностики in vitro.
Назначение
Основа агара HiMedia M1552-1KT рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из клинических и пищевых образцов.
Состав
Состав среды, г/л:
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Специальный пептон | 30,000 |
| Дрожжевой экстракт | 6,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Хлорид лития | 10,000 |
| Гидрофосфат натрия двузамещённый | 2,500 |
| Индикатор B.C. | 8,600 |
| α-метил-D-маннозид | 3,000 |
| Агар | 12,000 |
Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.
Конечное значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа или 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки OA Selective Supplement FD212A и стерильное содержимое одного флакона обогатительной добавки для Listeria II LM Enrichment Supplement II FD227.
- Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Listeria monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, вызывающий тяжёлые инфекции у беременных, которые могут приводить к выкидышу, мертворождению, рождению ребёнка с неонатальным листериозом и менингитом, а также к первичной бактериемии у взрослых и детей.
Патогенность Listeria ivanovii для человека не определена. L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами и не могут быть дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford. Основа агара для подтверждения L. monocytogenes представляет собой модификацию состава Ottaviani и Agosti для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes.
Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают необходимые для роста Listeria питательные вещества. α-Метил-D-маннозид является сбраживаемым углеводом. Хлорид лития и добавленные селективные добавки FD212 и FD213 подавляют сопутствующую микрофлору и повышают селективность среды в отношении видов Listeria. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а двузамещённый гидрофосфат натрия выполняет функцию буфера.
Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида. Фермент фосфолипаза C является важным фактором вирулентности и специфичен только для L. monocytogenes и L. ivanovii. Фосфолипаза C, продуцируемая L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат FD227, добавленный в среду, что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний.
Различение L. monocytogenes и L. ivanovii выполняют по утилизации α-метил-D-маннозида и активности PIPLC:
- L. monocytogenes сбраживает α-метил-D-маннозид, образуя жёлтые колонии с ореолом.
- L. ivanovii не сбраживает α-метил-D-маннозид, поэтому образует фиолетовые колонии с ореолом.
- Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.
Типы образцов
- Клинические образцы.
- Пищевые образцы.
Отбор и обращение с образцами
Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно утверждённым лабораторным процедурам.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Предупреждения и меры предосторожности
- Среда предназначена для диагностики in vitro.
- Только для профессионального применения.
- Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
- При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
- Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
- При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
- Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Ограничения применения
Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC, поэтому образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.
Рабочие характеристики
Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.
Контроль качества
Внешний вид
Внешний вид порошка: однородный, свободно сыпучий порошок от бежевого до фиолетового цвета.
Гелеобразование
Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
В чашках Петри образуется фиолетовый опалесцирующий гель.
Реакция и pH
Реакция: реакция 7,7%-ного водного раствора по массе при 25 °C.
pH: 7,00–7,40.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки OA Selective Supplement FD212A и обогатительной добавки для Listeria II LM Enrichment Supplement II FD227.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии | Активность PIPLC |
|---|---|---|---|---|---|
| Candida albicans ATCC 10231 (00054*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | ||
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | ||
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | ||
| Listeria innocua ATCC 33090 (00017*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | отрицательная |
| Listeria grayi ATCC 19120 | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | отрицательная |
| Listeria ivanovii ATCC 19119 | 50–100 | обильный | ≥50 % | светло-фиолетовый | положительная, непрозрачный ореол вокруг колонии, проявляющей активность фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы |
| Listeria monocytogenes ATCC 19112 | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | положительная, непрозрачный ореол вокруг колонии, проявляющей активность фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы |
| Listeria seeligeri ATCC 35967 | 50–100 | обильный | ≥50 % | светло-фиолетовый | отрицательная |
| Listeria welshimeri ATCC 43549 | 50–100 | обильный | ≥50 % | жёлтый | отрицательная |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Хранение и срок годности
- Температура хранения порошка: 10–30 °C.
- Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
- Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
- После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
- Неправильное хранение может привести к образованию комков.
- Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
- После использования плотно закрывайте контейнер.
- Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.
Утилизация
Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.
При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными метод
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
