Основа диагностического агара для листерий HiMedia M1552-100G (уп/100 гр)

Диагностическая питательная среда Основа диагностического агара для листерий HiMedia M1552-100G (уп/100 гр) производства HiMedia для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. Применяется для анализа клинического материала и пищевых продуктов; соответствует ГОСТ Р 54354-2011.

Область применения

Среда предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из проб пищевых продуктов и клинических образцов. Используется в микробиологических лабораториях для идентификации патогенов, вызывающих листериоз.

Принцип измерения и интерпретация

Основа диагностического агара для листерий является модификацией состава по Оттавиани и Агости.

Принцип работы

• Питательные компоненты: специальный пептон и экстракт дрожжей служат источниками азота и обеспечивают необходимые питательные вещества для роста листерий.
• Селективность: хлорид лития и добавляемые селективные добавки (FD212 и FD213) подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
• Осмотический баланс и буферизация: поддерживаются хлоридом натрия и гидрофосфатом натрия.
• Дифференциация: основана на способности L. monocytogenes ферментировать $\alpha$-метил-D-маннозид и активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC).

Интерпретация результатов

Фермент фосфолипаза C, специфичный для L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат (добавка FD227), что приводит к образованию опалесцирующего (матового) ореола вокруг колоний.

• Listeria monocytogenes: ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид $\rightarrow$ желтые колонии с ореолом.
• Listeria ivanovii: не ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид $\rightarrow$ пурпурные колонии с ореолом.
• Другие виды Listeria: не обладают активностью PIPLC $\rightarrow$ желтые или пурпурные колонии без ореола.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте одну ампулу стерильной регидратированной селективной добавки OA (FD212A) и одну ампулу обогатительной добавки LM II (FD227).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Пищевые продукты: сбор и обработка проб проводятся согласно установленным руководствам.
• Клинический материал: обработка образцов осуществляется по стандартным протоколам клинической микробиологии.
• Утилизация: после использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании добавок OA Selective Supplement (FD212A) и LM Enrichment Supplement II (FD227) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Требования к помещению: сухое вентилируемое помещение, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.

Совместимые добавки

Для полноценного функционирования среды поставляются следующие селективные и обогатительные добавки:

• FD212 L. mono Selective Supplement I / Селективная добавка L. mono I для листерий
• FD213 L. mono Selective Supplement II / Селективная добавка L. mono II для листерий
• FD227 L. mono Enrichment Supplement II / Обогатительная добавка L. mono II для листерий