Основа диагностического агара для листерий HiMedia M1552-100G (уп/100 гр)

Основа диагностического агара для листерий HiMedia M1552-100G (уп/100 гр) — порошковая питательная среда производства HiMedia, модифицированная по рецептуре агара Оттавиани—Агости (ALOA). Среда предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из клинического материала и пищевых продуктов с дифференциацией по активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида.

Назначение

Основа агара рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из клинических и пищевых образцов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE

Принцип действия и интерпретация

L. mono Confirmatory Agar Base представляет собой модификацию рецептуры Оттавиани и Агости (ALOA) для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes.

Listeria monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, способный вызывать тяжёлые инфекции у беременных, включая аборт, мертворождение, рождение ребёнка с неонатальным листериозом и менингитом, а также первичную бактериемию у взрослых и детей. Патогенность Listeria ivanovii для человека остаётся неопределённой.

L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами, поэтому не могут быть дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста Listeria. α-Метил-D-маннозид является ферментируемым углеводом. Хлорид лития и добавляемые селективные добавки FD212 и FD213 подавляют сопутствующую микрофлору и повышают селективность среды для видов Listeria. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а гидрофосфат динатрия выполняет буферную функцию.

Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида. Фермент фосфолипаза C является важным фактором вирулентности и специфичен только для L. monocytogenes и L. ivanovii. Фосфолипаза C, продуцируемая L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат FD227, добавленный в среду, с образованием непрозрачного ореола вокруг колоний.

Различение L. monocytogenes и L. ivanovii выполняют по утилизации α-метил-D-маннозида и активности PIPLC:

• L. monocytogenes ферментирует α-метил-D-маннозид, образуя жёлтые колонии с ореолом.
• L. ivanovii не ферментирует α-метил-D-маннозид, поэтому образует фиолетовые колонии с ореолом.
• Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC, поэтому образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки OA Selective Supplement FD212A и стерильное содержимое одного флакона обогатительной добавки LM Enrichment Supplement II FD227.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы и обращение с ними

• Тип образцов: клинические образцы и пищевые образцы.
• Пищевые образцы: сбор и обработку выполняйте с применением соответствующих методик согласно установленным руководствам.
• Клинические образцы: обращение выполняйте с применением соответствующих методик согласно установленным руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Назначение: диагностика in vitro.
• Применение: только для профессионального использования.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Информацию по безопасности можно получить в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и поэтому образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от бежевого до фиолетового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется фиолетовый опалесцирующий гель.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 7,7 % масс./об. при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.
• Культуральные характеристики: определяются с добавлением селективной добавки OA Selective Supplement FD212A и обогатительной добавки LM Enrichment Supplement II FD227 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях