Основа среды B Кинга HiMedia M1544-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды B Кинга HiMedia M1544-500G (уп/500 гр) — обезвоженная порошковая основа с конечным значением pH 7,2 ± 0,2. Применяется для неселективного выделения, культивирования и продукции пигментов бактериями рода Pseudomonas, включая флуоресцеин-продуцирующие штаммы.

Назначение

Основа среды B Кинга предназначена для неселективного выделения и культивирования видов Pseudomonas, а также для выявления продукции пигментов. Среда может использоваться для исследования пищевых продуктов, косметических образцов и клинического материала.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1544-500G
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Состав

Состав на 1 л готовой среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,23 г обезвоженной среды в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 15 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. В асептических условиях разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Pseudomonas aeruginosa способен продуцировать два типа пигментов — пиоцианин и флуоресцеин. Это характерное свойство помогает выделять Pseudomonas из клинического материала.

Дополнительный пигмент, называемый пиорубином, был описан Кингом. Окраска пигментов:

• пиоцианин — зелёная;
• флуоресцеин — флуоресцентно-жёлтая;
• пиорубин — красновато-коричневая.

Некоторые штаммы продуцируют все перечисленные пигменты, другие — один или два из них. P. aeruginosa может быть идентифицирован на среде Хью–Лейфсона (M826). Основа среды B Кинга особенно подходит для выявления флуоресцеина.

Среда B Кинга основана на рецептуре King и соавторов. Среда может применяться как универсальная неселективная среда для выделения видов Pseudomonas и выявления продукции пигментов из пищевых продуктов, косметических образцов и других материалов.

Agrobacterium традиционно идентифицируют как грамотрицательные бактерии, которые не продуцируют флуоресцентный пигмент на среде B Кинга и образуют опухоли или «бородатые корни» при инокуляции тестовых растений.

Функции компонентов среды:

• протеозопептон обеспечивает бактерии углеродистыми и азотистыми соединениями, необходимыми для роста;
• глицерин служит источником энергии и усиливает образование пигментов;
• магния сульфат также усиливает продукцию пигментов;
• пигменты и их производные, образуемые видами Pseudomonas, участвуют в работе сидерофорных систем поглощения железа бактериями, поэтому их образование значительно усиливается в условиях дефицита железа;
• продукция пигментов, особенно нефлуоресцентного синего пигмента пиоцианина, хорошо выявляется при культивировании на среде B Кинга, не содержащей добавленного железа;
• добавление дикалий фосфорнокислого повышает содержание фосфора в среде и тем самым усиливает продукцию флуоресцентного пигмента.

Условия инокуляции и инкубации

Для инокуляции используйте свежевыращенные культуры микроорганизмов на среде A Кинга:

1. Выращивайте микроорганизмы на среде A Кинга.
2. Инкубируйте культуры в течение ночи при 37 °C.
3. Затем выдерживайте культуры при комнатной температуре в течение 6 суток.
4. На среде B Кинга инкубируйте посевы при 37 °C в течение 6 суток.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид порошка: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

• Условия определения: водный раствор с концентрацией 4,22 % масса/объём, содержащий 1,5 % объём/объём глицерина, при 25 °C.
• Значение pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения готовой среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Техническое отличие от среды A Кинга

Среда B Кинга содержит глицерин и не содержит добавленного железа, благодаря чему применяется для усиления и выявления продукции пигментов Pseudomonas, особенно флуоресцеина и пиоцианина; для получения исходной культуры перед инокуляцией используют среду A Кинга.