HiMedia M1544-100G Основа среды Кинга B

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia M1544-100G для неселективного выделения, культивирования и образования пигментов у видов Pseudomonas. Основа применяется для микробиологического анализа пищевых продуктов, косметических образцов и клинического материала; масса упаковки — 100 г, температура хранения — ниже 30 °C.

Назначение

Kings Medium B Base предназначена для неселективного выделения и культивирования видов Pseudomonas, а также для индукции и выявления пигментообразования. Среда может применяться при исследовании пищевых продуктов, косметических образцов и клинического материала.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Происхождение: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Принцип действия и интерпретация результатов

Pseudomonas aeruginosa способна образовывать два типа пигментов — пиоцианин и флуоресцеин. Это характерное свойство используют для выделения Pseudomonas из клинического материала. King также описал дополнительный пигмент — пиорубин.

• Пиоцианин имеет зелёную окраску.
• Флуоресцеин имеет флуоресцентно-жёлтую окраску.
• Пиорубин имеет красно-коричневую окраску.

Некоторые штаммы образуют все перечисленные пигменты, другие — один или два. P. aeruginosa может быть идентифицирована на среде Hugh Leifson (M826). Основа среды Кинга B особенно подходит для выявления флуоресцеина.

Основа среды Кинга B разработана на основе формулы King и соавторов. Среду используют как универсальную неселективную среду для выделения видов Pseudomonas и образования ими пигментов из пищевых продуктов, косметических образцов и других материалов.

Agrobacterium традиционно идентифицируют как грамотрицательные бактерии, которые не образуют флуоресцентный пигмент на среде Кинга B и вызывают образование опухолей или «волосатых корней» при инокуляции тест-растений.

Протеозопептон обеспечивает растущие бактерии углеродистыми и азотистыми соединениями. Глицерин служит источником энергии и дополнительно усиливает образование пигмента. Сульфат магния также способствует пигментообразованию.

Пигменты и/или их производные, образуемые видами Pseudomonas, участвуют в переносе железа в составе сидерофорных систем бактерий. Поэтому образование пигментов значительно усиливается при дефиците железа. Образование пигментов, особенно нефлуоресцентного синего пиоцианина, хорошо выявляется при культивировании на среде Кинга B, не содержащей добавленного железа. Дикалий фосфат повышает содержание фосфора в среде и тем самым усиливает образование флуоресцентного пигмента.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,23 г обезвоженной среды в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 15 мл глицерина.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Асептически разлейте приготовленную среду в стерильные чашки Петри.

Инокуляция и инкубация

Для инокуляции используйте свежие культуры микроорганизмов, выращенные на среде Кинга A. Культуру инкубируют в течение ночи при 37 °C, затем выдерживают при комнатной температуре в течение 6 суток.

При использовании среды Кинга B инкубируйте посевы при 37 °C в течение 6 суток.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 4,22%-ного водного раствора по массе к объёму, содержащего 1,5 % глицерина по объёму, при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Наименование: основа среды Кинга B
• Артикул: M1544-100G
• Назначение: приготовление питательной среды для неселективного выделения и культивирования видов Pseudomonas, а также выявления пигментообразования
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения продукта: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Температурный диапазон, указанный для хранения в карточке: 10–30 °C

Хранение и срок годности

Храните порошок в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Сравнительный контекст

В отличие от сред общего назначения, основа среды Кинга B не содержит добавленного железа, что используется для усиления и визуального выявления образования пигментов видами Pseudomonas.

Производитель

HiMedia Laboratories Limited, Индия.