Основа среды Левенштейна – Йенсена без крахмала HiMedia M1542-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа среды Левенштейна – Йенсена без крахмала HiMedia M1542-500G (уп/500 гр)» — химически определённая порошкообразная основа без крахмала. Применяется для тестирования лекарственной устойчивости микобактерий; при культивировании бычьих и других глицерофобных штаммов добавление глицерина не рекомендуется.

Назначение

Основа среды Левенштейна–Йенсена без крахмала рекомендуется для определения лекарственной устойчивости микобактерий в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения.

Технические характеристики

Дополнительные характеристики:

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M1542-500G
• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав рассчитан на 600 мл:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 7,24 г порошка в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. Для бычьих бактерий и других глицерофобных микроорганизмов добавление глицерина не рекомендуется.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Одновременно асептически приготовьте 1000 мл эмульсии цельного яйца.
5. Осторожно добавьте основу к эмульсии яйца и перемешайте до получения однородной смеси.
6. Разлейте смесь в стерильные пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Разместите пробирки в наклонном положении.
8. Коагулируйте и уплотните среду в аппарате для уплотнения сред, водяной бане или автоклаве при 85 °C в течение 45 мин.

Принцип действия и интерпретация

Исходная среда Левенштейна была разработана Лёвенштейном и модифицирована Йенсеном и Груфтом с добавлением двух антимикробных агентов. Основа среды Левенштейна–Йенсена без крахмала предназначена для тестирования устойчивости микобактерий. Среда Левенштейна–Йенсена без картофельного крахмала с препаратами, внесёнными до уплотнения, представляет собой модификацию среды Международного союза борьбы с туберкулёзом.

Малахитовый зелёный подавляет рост большинства контаминирующих микроорганизмов, сохранившихся после процедур деконтаминации образца, благодаря чему создаются условия для максимально раннего роста микобактерий. При культивировании бычьих или других глицерофобных штаммов глицерин в среду не добавляют.

Малахитовый зелёный выполняет функции ингибитора и индикатора pH:

• образование синей зоны указывает на снижение pH под действием грамположительных контаминантов, например стрептококков;
• образование жёлтых зон указывает на разрушение красителя грамотрицательными палочками;
• протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.

Для каждого образца Харди и соавторы рекомендовали проводить посев и инкубацию в трёх повторностях:

• для выявления сапрофитов — при комнатной температуре 25 °C;
• для определения наличия или отсутствия пигментации у фотоchromогенных и скотохромогенных микобактерий — при 35 °C, попеременно на свету и в темноте, в зависимости от типа микроорганизма.

В стандартном режиме культивирование проводят аэробно при 35 °C.

Для стандартных процедур деконтаминации и выделения следует использовать соответствующие утверждённые лабораторные методики.

Тип образца

• Клинический образец: мокрота.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов следует применять соответствующие стандартные лабораторные методики деконтаминации и выделения.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от зеленовато-синего до павлинье-синего цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Смесь стерильной базовой среды и эмульсии цельного яйца после уплотнения коагулирует с образованием непрозрачных гладких скошенных поверхностей бледного голубовато-зелёного цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в присутствии 5–10 % диоксида углерода (CO₂), с добавлением основы эмульсии яйца, после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого продукта: при температуре ниже 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при рекомендованной температуре хранения.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно действующим руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеры роста на среде.
2. Каждая партия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователь должен валидировать пригодность среды с учётом индивидуальных требований.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством авток