Основа среды Левенштейна – Йенсена без крахмала HiMedia M1542-500G (уп/500 гр)

Диагностическая основа среды Левенштейна – Йенсена без крахмала HiMedia M1542-500G для определения чувствительности микобактерий к противотуберкулёзным препаратам. Рекомендуется для проведения тестов на лекарственную устойчивость Mycobacteria в соответствии с требованиями ВОЗ.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию классического состава Левенштейна, Йенсена и Груфта. В данной версии исключён картофельный крахмал, что позволяет вводить лекарственные препараты перед процессом инсписсации (сгущения) согласно рекомендациям Международного союза по борьбе с туберкулёзом и заболеваниями лёгких (IUAT).

Малахитовый зелёный выступает в роли ингибитора, подавляя рост большинства контаминантов, выживших после деконтаминации пробы, что способствует более раннему выявлению микобактерий. Также он служит индикатором pH:

• Образование синей зоны указывает на снижение pH из-за роста грамположительных контаминантов (например, стрептококков).
• Жёлтые зоны свидетельствуют о разрушении красителя грамотрицательными бациллами.
• Протеолитические контаминанты вызывают локальный или полный лизис среды.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 7,24 г основы в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. Примечание: для культивирования бычьих бактерий или других глицерофобных организмов глицерин добавлять не следует.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Параллельно приготовьте 1000 мл стерильной эмульсии цельного яйца, собранной асептически.
5. Осторожно добавьте эмульсию яйца в базовую среду и перемешайте до получения однородной смеси.
6. Разлейте смесь в стерильные пробирки с винтовыми крышками.
7. Установите пробирки под наклоном.
8. Проведите коагуляцию и инсписсацию среды в инсписсаторе, на водяной бане или в автоклаве при 85 °C в течение 45 минут.

Посев и инкубация

Для клинических образцов (мокрота) используются стандартные процедуры деконтаминации и изоляции. Рекомендуется проводить инокуляцию каждой пробы в трёх повторностях:

• Для идентификации сапрофитов при комнатной температуре (25 °C).
• Для определения наличия или отсутствия пигментации фотохромогенами и скотохромогенами при 35 °C (поочередно на свету и в темноте в зависимости от типа организма).
• Рутинное культивирование проводится в аэробных условиях при 35 °C.

Технические характеристики

Состав (на 600 мл)

Общие параметры

Контроль качества и культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдаются в присутствии 5–10 % углекислого газа (CO₂), с добавлением эмульсии яйца, после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: разные организмы могут иметь вариативные паттерны роста на данной среде. Рекомендуется валидация среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• Меры безопасности: только для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе с клиническими образцами использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Назначение: основа для приготовления диагностической среды.