HiMedia M1542-100G Основа среды Лёвенштейна-Йенсена без крахмала

Основа среды Лёвенштейна-Йенсена без крахмала HiMedia M1542-100G представляет собой химически определенную сухую питательную среду в порошке. Рекомендуется для тестирования лекарственной устойчивости микобактерий в соответствии с требованиями ВОЗ.

Принцип измерения и интерпретация

Среда является модификацией классического состава Лёвенштейна, дополненного изменениями Йенсена и Груфта. Вариант без картофельного крахмала с введением лекарственных препаратов до процесса инсписсации соответствует стандартам Международного союза по борьбе с туберкулезом и болезнями легких (IUAT).

Малахитовый зеленый в составе среды выполняет две функции:

1. Ингибитор: подавляет рост большинства контаминантов, выживших после процедур деконтаминации образца, что способствует более раннему росту микобактерий.
2. pH-индикатор: образование синей зоны указывает на снижение pH из-за грамположительных контаминантов (например, стрептококков), а желтые зоны свидетельствуют о разрушении красителя грамотрицательными бациллами.

Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.

Область применения

Применяется для культивирования и идентификации микобактерий.

• Тип образца: клинические образцы (мокрота).
• Режимы инкубации:
  • Рутинное культивирование: аэробно при 35 °C.
  • Идентификация сапрофитов: при комнатной температуре (25 °C).
  • Определение пигментации (фотохромогены и скотохромогены): при 35 °C с чередованием освещения и темноты.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 7,24 г порошка в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. Примечание: для культивирования бактерий крупного рогатого скота или других глицерофобных организмов глицерин добавлять не следует.
2. При необходимости нагрейте смесь до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 lbs pressure) в течение 15 минут.
4. Параллельно подготовьте 1000 мл цельнояичной эмульсии, собранной асептически.
5. Осторожно добавьте эмульсию в стерильную базовую среду и перемешайте до получения однородной смеси.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Установите пробирки под наклоном.
8. Проведите коагуляцию и инсписсацию (сгущение) среды в инсписсаторе, на водяной бане или в автоклаве при 85 °C в течение 45 минут.

Технические характеристики

Состав (на 600 мл)

Контроль качества

Внешний вид

• Порошок: однородный свободнотекущий порошок от зеленовато-синего до синего цвета «павлиньего хвоста».
• Готовая среда: после инсписсации смесь базовой среды и яичной эмульсии коагулирует в непрозрачные гладкие скосы бледно-сине-зеленого цвета.

Культуральные характеристики

Наблюдаются в присутствии 5–10 % углекислого газа (CO₂), с добавлением яичной эмульсии, после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: индивидуальные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Меры безопасности: только для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе с образцами использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.